代谢工程与调控第五章.pptxVIP

代谢工程与调控第五章;支架技术;代谢途径的中间产物可能对宿主产生毒性，被竞争途径消耗，或通过分泌丢失。

解决这些问题的一个新兴的策略是将合成途径的酶组合成多酶复合物。

多酶复合物在自然界中很常见，例如：由丝氨酸合成色氨酸的反应过程中，催化色氨酸合成的最后两个步骤的酶可以形成复合物，中间产物吲哚通过一个通道由一个活性位点到达另一个。

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;将合成途径的酶组合成多酶复合物是将途经中的酶共定位形成最优比例的复合物，可以增加途径代谢产物和酶的局部浓度，限制途径中间体的积累，减少与其他细胞成分之间不必要反应的发生。

将酶组合成复合物的一种方法是将催化连续反应的酶进行融合。酶-酶融合策略在某些情况下能够增强途径通量。但是其存在以下缺点：

①不适用于包含超过两个酶的途径；

②融合之后经常会导致一个或者两个酶活性的降低；

③不能轻易地改变复合物中酶的比例。

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;;蛋白质支架的应用---甲羟戊酸的生物合成;三种酶的活性不同，存在HMGS和HMGR之间流量不平衡的问题，导致中间产物羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)的积累。

HMG-CoA对宿主大肠杆菌细胞具有很强的毒性。

;通过蛋白质支架将HMG-CoA这个中间产物的产生酶(HMGS)和消耗酶(HMGR)之间共定位。调节两个酶的比例，使甲羟戊酸的产量提高了10倍。

通过另外一个支架分子将途经的第一个酶(AtoB)引入