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生物制药技术与市场手册

第1章生物制药技术基础与原理

1.1基因工程与重组DNA技术

重组DNA技术的核心是将外源基因与载体DNA连接，形成表达载体，随后将载体导入宿主细胞，利用宿主细胞的代谢系统将基因转录为mRNA并翻译为蛋白质。以人胰岛素为例，科学家首先通过PCR扩增人胰岛素基因片段，然后利用限制性内切酶（如EcoRI和HindIII）切割，将其与含有启动子（如CMV启动子）和终止子的质粒载体进行连接，构建出重组表达质粒。在转化实验中，重组质粒通过电穿孔或化学转化法导入大肠杆菌感受态细胞中，转化效率通常需达到$10^8$至$10^9$个拷贝