第十五章重组技术的基本原理.pptVIP

第十五章重组技术的基本原理演示文稿;（优选）第十五章重组技术的基本原理;一、重要的工具酶及其作用特点;第4页，共42页。;（二）DNA连接酶;（三）DNA聚合酶;第7页，共42页。;（四）逆转录酶;（五）RNA聚合酶;第10页，共42页。;二、目的基因的载体类型及其功能;（一）质粒及其功能;;（二）噬菌体及其功能;（三）考斯质粒;（四）动物病毒的载体作用;;诱导植物产生瘤细胞;第二节DNA重组的基本技术步骤;第20页，共42页。;;一、目的基因的制备方法

基因工程的主要目的是通过优良性状相关基因的重组，获得具有高度应用价值的新物种。

为此，必须从现有生物群体中，根据需要分离用于克隆的此类基因，这样的基因通常称为目的基因。;（一）建立DNA文库;基因组文库建立顺序;基因文库和cDNA文库的建立;（三）人工合成DNA片段;（四）聚合酶链式反应（PCR）扩增DNA;PCR技术原理示意图;二、目的DNA和载体的体外连接;三、将重组的DNA复合物导入受体细胞;（一）重组DNA分子转化

大肠杆菌是用得最广泛的基因克隆受体。

转化（transformation）：携带目的基因的外源DNA分子通过与膜结合进入受体细胞，并在其中稳定维持和表达的过程。以质粒为载体。

;转化;（二）噬菌体重组体的转染

转染：通过噬菌体(病毒)颗粒感染，把DNA导入被感染的受体细胞的过程。