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微观世界：酵母活性实验全记录

实验日期：2025年4月11日

实验地点：生物实验室

一、实验目的

验证酵母菌在适宜条件下具有发酵活性。

观察不同糖源（葡萄糖、蔗糖）对酵母发酵速率的影响。

记录和分析酵母培养条件（温度、pH）对发酵产物产生的影响。

掌握酵母活性检测的基本方法。

二、实验材料

1.器材

试管×20根

恒温水浴锅（30°C、35°C）

温度计

计时器（精度0.1小时）

pH计

生物显微镜

移液器及无菌吸头

血球计数板

pH缓冲液

2.试剂与菌种

酵母菌悬液：实验室提供的活性干酵母，悬浮于生理盐水中。

糖溶液：

葡萄糖溶液（10%）

蔗糖溶液（10%）

磷酸盐缓冲液（PBS）

碘液（用于淀粉检测）

溴甲酚绿指示剂（pH指示）

1mol/LHCl、NaOH（pH调节）

MTT溶液（MTT法可选）

三、实验方法

Step1：酵母活性初步测试（发酵试验）

取5支试管，分别标记：C0（对照，仅加PBS）、G（葡萄糖）、S（蔗糖）。

各管分别加入：

5mL相应糖溶液

1mL生理盐水

1mL酵母菌悬液

盖好试管口，置于恒温水浴锅中（30°C），开始计时。

每隔30分钟观察并记录气泡产生情况（二氧化碳），并用血球计数板计算酵母菌数量变化。

进行到设定时间（如4小时）或观察到气泡不再产生为止。

Step2：温度影响测试

设置三个温度条件：25°C、30°C、37°C