细菌学教学课件 细菌的基因表达.pptVIP

第五章细菌的基因表达;一、细菌基因与基因工程概念

;二、基因工程相关的酶学;2.1核酸限制性内切酶

（restrictionendonuclease)

;2.1.3影响限制性核酸内切酶的活性

*DNA纯度

*DNA甲基化程度

*底物DNA的分子结构

*反应温度

*反应系统组成;2.2DNA连接酶(ligase);2.3聚合酶（polymerase);＊T4噬菌体DNA多聚酶

用于DNA片段末端标记

＊经修饰的T７噬菌体DNA聚合酶

用于双脱氧终止法测序

*TaqDNA聚合酶

用于DNA序列分析

聚合酶链反应（PCR)

*逆转录酶

（reversetranscriptase)

原核、真核生物mRNA

转录成cDNA;三、基因工程的载体;3.1质粒载体;3.1.3质粒的不相容性

＊不相容性：指某种质粒在寄主细胞存在时，将阻止其它类质粒进入细胞寄居。

＊同一不相容群的质粒不能在同一寄主中寄居。（如质粒pBR322与pUC19都具有PMB1复制子）

＊非同一不相容群的质粒，可以在同一寄主中寄居。（如质粒pBR322与pSC101分别具有PMB1和PSC101复制子）

3.1.4质粒的转移性

1、接合转移(conjugation)

2、转化(transformation)

*感受态转化