细胞基因组的提取.pptVIP

细胞基因组的提取演示文稿;（优选）细胞基因组的提取;核酸制备时应注意的事项:

①尽量简化操作步骤，缩短提取过程。

②减少化学因素对核酸的降解。

③减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力和高温

④防止核酸的生物降解。;核酸制备的步骤：

;核酸酶的抑制和抑制剂

降低温度，改变pH及盐的浓度，都利于对核酸酶活性的抑制，但均不如利用核酸酶抑制剂更有利，当然，几个条件并用更好。

对于DNA，抑制DNase活力很容易，但防止机械张力拉断则更重要。

对于RNA，因分子较小，不易被机械张力拉断，但抑制RNase活力较难，故在RNA提取中设法抑制RNase更重要。;核酸酶的抑制和抑制剂

DNase抑制

①加入少量金属离子螯合剂，如0.01mol/LEDTA或柠檬酸钠，DNase基本可以全部失活。

②去垢剂、蛋白变性剂及DNase抑制剂也可使DNase失活。;核酸酶的抑制和抑制剂

RNase抑制

①操作要带手套。

②所有器皿要严格消毒，

③试剂处理

④低温操作

⑤在分离过程中要加入一定的RNase抑制剂。;核酸制备中常用的去垢剂

核酸本身带负电荷，结合带正电荷的蛋白质