基因技术核心外源基因高效表达与精准调控.pptxVIP

DNA重组（限制性内切酶）

运送工具——基因克隆载体

目标基因的制备

目标基因导入受体细胞

外源基因的表示

基因工程的应用;目标基因;第六章外源目标基因表示与调控;第一节外源基因表示机制;。

;;;二、外源基因mRNA的有效翻译;（1）氨基酸活化和肽链的起始：

AA+tRNA+ATP——AA-tRNA+AMP+PPi

（2）肽链的起始：

原核生物：30S+mRNA——+AA-tRNA——+50S

真核生物：40S+AA-tRNA——+mRNA——+60S

（3）肽链的延伸：肽基转移酶

（4）肽链的终止：终止密码子(UAA、UAG、UGA)和终止因子

（5）折叠和加工;氨酰tRNA;;B：延伸;C：终止;DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还涉及促进这一过程的调整蛋白的结合位点。;转录起始点：通常是一种嘌呤(A或G)

Pribnow框，又叫-10区：TATAAT

Sextama框，又叫-35区：TTGACA

间隔区;;Pribnowbox;rRNA基因开启子（Ⅰ型）：rRNA

mRNA基因开启子（Ⅱ型）：mRNA、部分核内小分子RNA（snRNA）

tRNA基因开启子（Ⅲ型）：5SrRNA、tRNA、snRNA;rRNA基因开启子（Ⅰ型）;mRNA基因开启子（Ⅱ型）;tRNA基因开启子（Ⅲ型）;真核和原核的开启子有很多不同：;二、