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医疗行业检验科检验师血液检测作业手册

第1章基础理论与仪器原理

1.1细胞学检测原理与操作流程

细胞学检测（Cytology）是血液科检验的核心技术之一，主要通过对外周血涂片进行显微观察，以鉴别白血病、淋巴瘤、骨髓增殖性肿瘤等血液系统的恶性肿瘤。其核心原理是利用光镜下细胞形态、核质比、染色质分布及细胞分裂象的形态学特征，结合FlowCytometry（流式细胞术）进行免疫分型。在操作流程中，首先需采集外周血10-20mL，经抗凝管（如EDTA-K2）或无抗凝管采集，离心后吸取上层单核细胞层置于玻片载玻片上。对于流式细胞术，需将样本置于200μL的抗凝管中，通过磁珠磁选富集单核细胞，避免红细胞干扰，确保细胞计数准确。

涂片制作需严格遵循“薄、平、匀”原则，通常采用10倍油镜观察，细胞间距应小于10μm，细胞层厚度不超过20μm，以保证光学显微镜的成像质量。若使用流式细胞仪，需确保细胞在样本中的浓度达到1×10?/μL以上，且细胞间干扰因子（如血红蛋白）浓度低于100μg/L，否则需进行细胞破碎处理。染色是细胞学检测的关键步骤，常用Giemsa染液（吉姆萨染液）进行Wright-Giemsa染色，可清晰显示细胞核的形态特征。对于白血病细胞的分型，需结合特异性抗体染色（如CD341、CD1331、CD1332等标记物），在显微镜下