明胶酶谱实验.docxVIP

1)???母液配制：

1.???10X明胶溶液（50ml）：称取500mg明胶，加入高压灭菌三蒸水约40ml，室温放置2h，使其吸水膨胀，然后置于65°C水浴，在15min之内溶成均匀的液体，最后定容至终浓度10mg/ml，于4°C备用。注：样本量较多时一次性配制50ml，分装于5mlEP管中-20°C备用。

2.???10X50mMTris-HCl母液（2L）：即0.5MTris-Hcl。称取121.14gTris-base，双蒸水溶解后浓盐酸调节pH值至7.5，定容至2L。

3.???20X5mMCaCl2母液（1L）：即100mMCaCl2（分子量111）。称取11.1gCaCl2，双蒸水溶解后定容至1L。

4.???2000X1uMZnCl2母液（1L）：即2mM/LZnCl2（分子量136.30）。称取0.2726gZnCl2，双蒸水溶解后定容至1L。（注：使用浓度实在太小，只好配大体积的母液增加精准度。ZnCL2在水中呈絮状，用前剧烈震荡均匀）

5.???10X2.5%TritonX-100母液（400ml）：即25%TritonX-100。100mlTritonX-100原液双蒸水稀释至400ml。4度保存备用。

6.???10XBrij-350.02%母液（500ml）：即0.2%Bri