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- 2026-05-22 发布于四川
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;1.PCR技术及其应用
(1)PCR技术与病毒检测
某些病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光PCR鉴定。实时荧光PCR扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA,可与目的基因中部分序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶分解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到(如图甲),通过实时荧光PCR检测这些病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图乙。;(2)基因定点突变与基因改造
重叠延伸PCR技术是一项重要的基因定点突变技术,其主要设计思路是用具有互补配对片段的引物(图中的引物2和3,突起处代表与模板链不能互补的突变位点)分别进行PCR,获得有重叠链的两种DNA片段,再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得想要的目的基因。水蛭素是一种蛋白质,可;2.基因编辑技术及其应用
CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑,
其原理是由一条单链向导RNA(SgRNA)引导内切核酸酶
Cas9到一个特定的基因位点进行切割(如图)。
CRISPR复合体中的SgRNA的主要功能是与靶向基因(目的基因)上特定碱基序列互补,从而定向引导Cas9蛋白与靶向基因结合,并在特定位点切割DNA。
CRISPR/Cas9基因编辑技术培育转基因生物,与传统的基因工程相比,其明显优点是可将目的基因定点插入所需位点
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