明胶酶谱实验方法的优化.pdfVIP

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doi：10．39696，issn．1009—0002．2014．01．026技术方法

明胶酶谱实验方法的优化

章淑平，骆建民，王俐。

汕头大学医学院a．第一附属医院；b．病理生理教研室；广东汕头515041

[摘要]目的：优化明胶酶谱实验方法，并检测不同浓度凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌的明胶酶B(MMP一9)活

性的变化。方法：用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分开上清中各蛋白条带，经2．5％TritonX一100洗脱、明胶酶缓冲

液孵育、考马斯亮蓝染色液染色及脱色液脱色后，经光密度扫描记录，应用ImageJ软件进行密度计量分析。结果：凝

血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌MMP一9具有浓度依赖性。结论：利用优化的明胶酶谱实验方法可做出高质量的明

胶酶谱图片，对检测明胶酶活性有重要意义。

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