生物制药技术与质量控制手册_1.docxVIP

生物制药技术与质量控制手册

第1章生物制药研发与工艺设计

1.1生物活性物质特性与工艺参数选择

首先需明确目标蛋白的理化性质，如溶解度、热稳定性及沉淀倾向，这是设计工艺的前提；例如，若目标蛋白为牛血清白蛋白（BSA），其等电点约为4.7，在pH4.5时溶解度最低，因此工艺参数选择必须避开该区间。需根据蛋白的分子量估算其分子量分布，常用SDS或动态光散射（DLS）技术测定；例如，对于50kDa的抗体，其分子量分布应控制在PDI0.2，以确保批次间重现性。

必须测定蛋白的缓冲液兼容性，如磷酸盐缓冲液（PBS）与蛋白的相互作用可能导致盐析；例如，在配制培养基时，需将NaCl浓度控制在100mM以下，防止高盐环境破坏蛋白构象。需评估蛋白的氧化敏感性，通过体外氧化实验（如TEMED诱导）测定半衰期；例如，若目标蛋白对氧化敏感，工艺中需严格控制氧气通量，并在发酵罐内添加抗氧化剂如10mM的DTT。需测定蛋白的粘度特性，以预测发酵过程中的传质与传热性能；例如，对于高粘度的重组蛋白，需根据粘度计算雷诺数，确保混合效果达到层流状态。

需确定蛋白的结晶倾向，通过自发结晶实验或添加晶种确定最佳结晶条件；例如，若目标蛋白倾向于形成六方晶系，工艺参数应确保最终产品为六方晶型，以利于下游纯化。

1.2生物反应器设计与放大策略

需根据目标蛋白的发酵