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多肽质谱鉴定实验报告

一、实验材料与仪器

（一）实验材料

待测样品：本次实验选取的是从大鼠肝脏组织中提取的总蛋白质溶液，浓度为2.5mg/mL，经SDS电泳检测，蛋白质条带清晰，无明显降解现象。

试剂：

胰蛋白酶：购自Promega公司，测序级，浓度为0.1μg/μL，用50mM乙酸溶液溶解，分装后于-20℃保存。

乙腈（ACN）：色谱纯，购自Merck公司，使用前经0.22μm滤膜过滤。

甲酸（FA）：质谱级，购自ThermoFisherScientific公司，浓度为99%。

碳酸氢铵（NH?HCO?）：分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司，配制成50mM水溶液，用于蛋白质酶解缓冲液。

二硫苏糖醇（DTT）：购自Sigma-Aldrich公司，配制成100mM水溶液，用于还原蛋白质中的二硫键。

碘乙酰胺（IAA）：购自Sigma-Aldrich公司，配制成200mM水溶液，用于烷基化蛋白质中的半胱氨酸残基。

C18脱盐柱：购自Waters公司，规格为100mg/1mL，用于酶解多肽样品的脱盐处理。

耗材：

离心管：1.5mL和0.5mL离心管，购自Eppendorf公司，经无酶处理。

移液器吸头：10μL、100μL和1000μL，购自Axygen公司，无RNase/DNase。

质谱进样瓶：2mL，带内插管，购自ThermoFisherScientific公司。

（二