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基因编辑技术原理与应用手册

基因编辑技术基础原理与应用手册

第1章基因编辑技术基础原理

第一节核酸酶作用机制与脱靶效应

核酸酶是基因编辑的核心执行工具，其核心功能是通过特异性识别并切割目标DNA序列，从而引发细胞自身的修复机制，最终实现基因序列的精准编辑。以CRISPR-Cas9系统为例，Cas9蛋白在向导RNA（gRNA）的引导下，能够精确地寻找并切割位于目标位点的DNA双螺旋结构。切割作用并非发生在DNA双链之间，而是发生在两条互补链的断裂处，这种“切口”结构被称为DSB（双链断裂），是后续基因编辑操作的前提条件。为了引导Cas9蛋白精准到达目标