生物技术与产业发展手册
第1章前沿技术原理与基础
1.1基因编辑与分子生物学技术
在分子生物学层面,CRISPR-Cas9系统通过向导RNA(gRNA)精准定位目标DNA序列,Cas9蛋白在向导RNA的指引下形成核酸酶活性,从而切断目标DNA链,实现基因敲除或插入。例如,利用该技术在玉米中敲除NtC2H2转录因子基因,可显著降低植株对干旱环境的耐受性,使其在缺水条件下产量下降约30%,这为理解基因功能调控提供了直观依据。分子克隆技术是构建重组DNA的核心,其流程包括质粒提取、限制性内切酶切割、连接酶连接及转化大肠杆菌筛选。以构建抗虫转基因番茄为例,首先从
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