发酵液中β-胡萝卜素的测定 高效液相色谱法-意见稿.docx

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附录A

（规范性）

β-胡萝卜素标准储备溶液浓度的校正

A.1试剂和材料

正己烷：分析纯。

A.2仪器和设备

A.2.1分光光度计。

A.2.2比色皿：1cm。

A.3试验步骤

准确吸取β-胡萝卜素标准储备溶液1.0mL，置于25mL棕色容量瓶中，加正己烷稀释并定容至刻度，摇匀。准确吸取该溶液1.0mL，置于10mL棕色容量瓶中，加正己烷稀释并定容至刻度，摇匀。以正己烷为空白对照，于450nm处测定吸光度数值。

A.4结果计算

β-胡萝卜素标准储备溶液浓度的准确数值以X1计，数值以克每升(μg/mL）表示，按公式（A.1）计算：

X式中：

A——β-胡萝卜素标准储备溶液稀释后所得的吸光度的数值；

25——第一次稀释时定容的体积的数值，单位为毫升（mL）；

10——第二次稀释时的稀释倍数的数值；

0.2620——β-胡萝卜素在正己烷中的比吸光系数的数值；

1.0——吸取β-胡萝卜素标准储备溶液的体积的数值，单位为毫升（mL）。

试验结果以三次平行测定结果的算术平均值表示。

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附录B

（规范性）

β-胡萝卜素标准溶液（1.0μg/mL）高效液相色谱图

β-胡萝卜素标准溶液（1.0μg/mL）高