核酸分子杂交与应用.pptxVIP

08七月20261核酸分子杂交

08七月20262核酸分子杂交：来源相同或不同的DNA甚至DNA与RNA分子变性后，在合适的条件下通过碱基互补形成双链杂交体的过程称核酸分子杂交(molecularhybridization)。核酸分子杂交技术是目前生物化学和分子生物学研究中应用最广泛的技术之一，也是临床分子检验的重要技术。

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08七月20264核酸探针的标记探针(probe)是指用放射性核素或其它标记物标记的核酸片段。标记物放射性标记非放射性标记生物素标记地高辛标记荧光素标记

08七月20265探针的种类DNA探针：双链或单链DNA探针是最常用的核酸探针。长度在几百碱基对以上。DNA探针又分为：基因组DNA探针：有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针，多为某一基因的全部或部分序列，或某一非编码序列。cDNA探针：以mRNA为模板经过逆转录酶催化产生的互补于mRNA的DNA链。

08七月20266探针的种类DNA探针优点：1、一般克隆在质粒载体中，可以无限繁殖；2、DNA探针不易降解3、DNA的标记方法比较成熟。

08七月20267探针的种类RNA探针：可以是标记分离的RNA，也可以是重组质粒在RNA聚合酶作用下的转录产物。其优点是：RNA探针为单链，复杂性低，与靶序列杂交反应效率极高因不存在重复序列，因此特异性高本底低缺点