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2025年浙江pcr培训考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.实时荧光定量PCR（qPCR）中，SYBRGreenI染料的作用机制是？

A.特异性结合双链DNA小沟区

B.与引物5’端荧光基团发生FRET

C.嵌入双链DNA碱基对之间发出荧光

D.标记靶序列特定位置的核苷酸

答案：C

2.某实验室使用qPCR检测EB病毒，扩增程序设置为：95℃预变性3min，95℃15s，60℃30s，共40个循环。若引物退火温度实际应为58℃，可能导致的结果是？

A.非特异性扩增减少

B.扩增效率降低

C.荧光信号强度显著增强

D.熔解曲线峰型更尖锐

答案：B

3.核酸提取过程中，若样本为全血，使用磁珠法提取时，加入蛋白酶K的主要目的是？

A.裂解红细胞膜

B.破坏白细胞核膜

C.降解样本中的蛋白质

D.中和样本中的盐离子

答案：C

4.以下哪种情况不会导致qPCR出现假阴性结果？

A.样本中存在Taq酶抑制剂（如肝素）

B.引物与靶序列存在3’端错配

C.扩增循环数由40增加至45

D.提取的核酸浓度低于检测下限

答案：C

5.实验室进行PCR污染排查时，若空白对照（无模板）出现扩增曲线，首先应排查的污染源是？

A.样本间交叉污染