红细胞膜蛋白提取流程.pptVIP

红细胞膜蛋白提取鉴定;实验分组;一.红细胞膜提取制备（低渗法）;注意事项：;（1）RBC分离：

15mlRBC液

2000rpm5分钟

RBC（沉淀）＋3倍体积等渗磷酸Buffer

2000rpm5分钟×2

洗净之RBC

（2）溶血液制备

RBC加入低渗磷酸buffer（1:50)

(在烧杯中）稍搅拌

置冰箱冻格（4?C）溶血过夜

（以上步骤已完成！！）;二、RBC膜纯化（洗涤）;作图：

横坐标以标准蛋白含量

纵坐标以A620吸光度值

图比例应为3:2（横：纵）

计算：

在标准曲线上查出待测样品的浓度，计算

提取膜的Prmg数/ml样品

注意稀释倍数

要求：计算原提取RBC液的Pr含量

;五、SDS测定膜蛋白分子量;（一）垂直板安装

每套板两