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2026年“检验医学新技术”(国家级)继续教育试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.关于CRISPR-Cas13系统在分子诊断中的应用原理，下列说法最准确的是（）

A.利用Cas13蛋白特异性切割双链DNA，通过荧光信号放大检测靶标

B.通过Cas13蛋白的RNA指导识别并切割单链RNA，激活非特异性切割报告RNA，实现信号级联放大

C.依赖Cas9蛋白的核酸内切酶活性，对靶基因进行精确编辑后通过测序检测

D.利用DNA聚合酶的链置换活性，在等温条件下扩增靶标RNA片段

【答案】B

【解析】CRISPR-Cas13系统属于VI型CRISPR系统，其关键特征是在识别靶向单链RNA后，激活非特异性的“旁切”活性（collateralcleavage），切割体系中预先加入的荧光-淬灭基团标记的报告RNA，从而释放荧光信号。这一机制实现了信号的双重放大（靶标识别与报告分子切割的催化循环）。选项A描述的是Cas9或Cas12对双链DNA的切割特征；C选项描述的是基因编辑而非诊断应用；D选项描述的是等温扩增技术（如RPA或LAMP）的原理，而非CRISPR系统的核心机制。Cas13区别于Cas12的关键在于其靶标为RNA，且切割行为在识别后伴随持续的催化活性，这使得其在微量RNA检测中具有极高灵敏度。

2.在液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测血清25-羟基维