高二生物动物细胞融合和单克隆抗体1.pptx

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动物细胞工程

;融合原生质体AB;动物细胞融合;动物细胞融合;;;;动物细胞融合技术意义;单克隆抗体;单克隆抗体;单克隆抗体;单克隆抗体与多克隆抗体;1、单克隆抗体McAb(概念);一个B淋巴细胞只分泌一个特异性抗体

骨髓瘤细胞(癌细胞)能无限增殖;单克隆抗体制备;单克隆抗体制备;单克隆抗体制备;;制备单克隆抗体方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶瘤细胞变异株与脾脏B细胞融合。

采取HAT选择性培养基(培养基中加次黄嘌呤HyPoxanthine?H,氨基喋呤Aminoopterin?A及胸腺嘧啶核苷Thymidine?T),在这种选择性培养基中,因为变异瘤细胞不含有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷激酶,所以不能利用培养基中次黄嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA。而只能利用谷酰胺与尿核苷酸单磷酸合成DNA,这一路径又被氨基喋呤所阻断,所以未融合瘤细胞不可防止也要死亡。

融合杂交瘤细胞因为脾淋巴细胞含有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶,能够经过次黄嘌呤合成DNA,克服氨基喋呤阻断,所以杂交瘤细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在普通培养基中不能长久生长,普通于二周内均死亡。;;单克隆抗体;谢谢大家!

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