非洲猪瘟p54蛋白的原核表达和纯化.docx

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非洲猪瘟病毒P54蛋白的原核表达和纯化

摘要：p54蛋白是非洲猪瘟病毒（ASFV)的主要结构蛋白之一，对内质网膜的募集和转化进入病毒包膜的前体极其重要。为了进一步探究p54蛋白的免疫功能，本研究将ASFVp54截短蛋白基因插入原核表达载体pET28a，构建重组质粒p54-pET28a，然后将重组质粒p54-pET28a转入BL21(DE3)细胞中进行诱导表达，通过摸索诱导温度、时间及诱导剂浓度，确定p54蛋白可溶性表达的最佳条件，并利用融合标签His-tag对p54蛋白进行纯化，SDS结果显示表达的p54蛋白大小为20kDa，和预期大小相符，Westernblo