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高中生物学选择性必修三基因工程专题一知识清单

一、基因工程的基本工具——“分子手术台”上的精良装备

基因工程作为在DNA分子水平上进行设计和施工的精细技术，其操作离不开三类基本的分子工具，它们分别被称为“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”【重要】。

（一）第一类工具：限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

限制性内切核酸酶，简称限制酶，主要来源于原核生物。其生物学意义在于能识别并切割外来的外源DNA（如噬菌体DNA），而对自身的DNA（通常因甲基化修饰）不起作用，构成了原核细胞的防御系统【基础】。

1.功能与特性：限制酶具有高度的专一性，能够识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并切割每一条链上特定位置的磷酸二酯键【基础】。这种识别序列通常由4、6或8个核苷酸组成，且多为回文序列，即该序列在双链DNA上正向与反向读序一致。

2.切割方式与末端类型：由于切割机制的不同，限制酶切割DNA后会形成两种类型的末端：

1.3.黏性末端：酶在识别序列的两条链上错开几个核苷酸进行切割，产生具有单链突出末端的DNA片段。这种末端因能通过碱基互补配对重新结合而得名【重要】。

2.4.平末端：酶在识别序列的对称轴上同时切割两条链，产生无单链突出的DNA片段【重要】。

5.★【高频考点】限制酶的选择策略：在基因工程操作中，如何选择合适的限制酶是决定实验成败的关键。

1.6.