热考微专题18PCR技术的原理与应用.docxVIP

热考微专题18PCR技术的原理与应用

真题示例

例1(2025·河北卷)X染色体上的D基因异常可导致人体患病，在男性中发病率为13500，某患病男孩(其母亲没有患病)X染色体上的基因D和H内各有一处断裂，断裂点间的染色体片段发生颠倒重接。研究者对患儿和母亲的DNA进行了PCR检测，所用引物和扩增产物电泳结果如图。不考虑其他变异，下列分析错误的是(

注：引物组合S1和S2，R1和R2可分别用于对正常基因D和H序列的扩增检测。

A．该病患者中男性显著多于女性，女性中携带者的占比为1

B．用R1和R2对母亲和患儿DNA进行PCR检测的结果相同

C．与正常男性相比，患病男孩X染色体上的基因排列顺序发生改变

D．利用S1和S2进行PCR检测，可诊断母亲再次孕育的胎儿是否患该病

例2(2025·陕晋青宁卷)马铃薯作为重要农作物，提高其冷耐受性可拓展优质马铃薯的种植区域。我国科研人员发现，野生马铃薯中S基因的表达与其冷耐受性调控有关，将该基因导入栽培马铃薯中可显著增强其抗寒能力。回答下列问题。

(1)PCR扩增目的基因时，需要模板DNA、引物、________________、含Mg2＋的缓冲液和耐高温的DNA聚合酶。DNA聚合酶在PCR的________步骤中起作用。

(2)图中标识了载体和S基因中限制酶的切割位点。为将S基因正确插入载体，PCR扩增S基因时需在引物的________