酶工程复习材料凝胶亲和离子交换层析详解.pdf

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酶工程复习材料

1.简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点?

离子交换层析原理:根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。

操作:a上样:上样体积不十分严格。b洗脱:增加溶液的离子强度c梯度洗脱

物彼此靠近活性中心浓度增大底物与结合部位按有利于催化反应的方向定位Km米氏常数指最大反应速度一半时的底物浓度酶比活力单位质量的酶催化活力酶催化常数即在最适条件下没摩尔酶每分钟所转化的底物摩尔数盐析即利用中性盐与蛋白质争夺水相原理沉淀蛋白质的

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