生物技术前沿6基因工程可编辑全文.pptVIP

2011-03-15*命名：pUC载体由UniversityofCalifornia的J.Messing和J.Vieria于１９７８年发明．来源：在pBR322的基础上，组入了一个lacZ’基因（其5’-端带有一段多克隆位点)，而发展的具有双功能检测特性的新型质粒载体。3.2pUC系列2011-03-15*特点:（1)相对分子质量小（2)元件来源①复制起点（pBR322的ori)②Ampr基因（pBR322的Ampr基因)③lacZ的启动子（Ｅ.coli)④lacZ’基因（3)多克隆位点10个连续的单一酶切位点，位于lacZ’基因5’端。（4)选择标记氨苄青霉素抗性和蓝白斑选择相结合。2011-03-15*2011-03-15*蓝白斑选择原理:5-溴-4-氯-3吲哚-?-D-半乳糖苷由lacZ’基因编码无色深蓝色2011-03-15*MCS无外源基因插入时，为蓝菌斑;MCS有外源基因插入时，为白菌斑。通过直接观察菌斑颜色就能知道是否有DNA插入。2011-03-15*2011-03-15*(5)pUC系列载体的优点①更小的分子量如pUC18为2682bp，pUC8为2750bp②