《实验动物志贺菌检测方法》.docxVIP

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实验动物志贺菌检测方法

1范围

本文件规定了实验动物志贺菌（Shigellaspp.）的检测方法。

本文件适用于猴志贺菌的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.5-2012食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验

GB/T14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集

GB/T14926.43-2002实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

4.1核酸检测：依据核酸体外扩增基本原理，对志贺菌特异性靶基因ipaH序列设计引物和荧光标记探针，进行实时荧光PCR扩增，通过Ct值及扩增曲线进行标本检出结果判定。

4.2细菌培养：志贺菌是革兰阴性短杆菌，在三糖铁或双糖铁等培养基上具有特定的生长和生化特征。因此，可通过选择性培养基培养、生化和血清试验鉴定志贺菌。

5主要设备

5.1普通恒温培养箱。

5.2微生物生化鉴定系统。

5.3实时荧光PCR仪。

6培养基及试剂

6.1培养法试剂

6.1.1Cary-Blair运送培养基：成分及配制方法见GB/T1