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基因工程完整版期末复习总结（精细整理Word版）

第一章基因工程绪论

1.1基因工程定义

基因工程又称重组DNA技术、分子克隆技术。是指在体外人工条件下，将供体生物的目的基因进行分离、剪切，与载体DNA拼接重组，构建全新重组DNA分子，随后导入受体宿主细胞，使其在宿主细胞内稳定复制、遗传、转录与翻译表达，最终获得目标基因产物或生物新性状的现代生物技术。

基因工程三大核心组成元件：供体（目的基因来源）、载体（基因运载工具）、受体（宿主表达细胞）。

1.2基因工程完整操作流程

核心七步口诀：分、切、连、转、选、鉴、表达

1.分：从基因组DNA、mRNA或人工合成途径，分离获取目的基因片段；

2.切：利用限制性核酸内切酶，分别切割目的基因与载体DNA，产生匹配末端；

3.连：通过DNA连接酶，体外连接目的基因与载体，形成重组DNA分子；

4.转：将重组DNA分子导入宿主细胞（转化、转染、转导等方式）；

5.选：利用标记基因筛选，初步获得含有重组分子的阳性克隆；

6.鉴：通过酶切、PCR、测序、核酸杂交等技术，精准鉴定重组子；

7.表达：诱导目的基因在宿主细胞内转录、翻译，合成目标蛋白质或呈现新性状。

1.3基因工程诞生基础

1.3.1理论基础

1.证实DNA为生物遗传物质；

2.阐明DNA双螺旋结构与半保留复制机制；

3.破译生物通用遗传密码；

4.提出