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- 2026-09-19 发布于四川
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(新)结核T细胞斑点试验(2篇)
第一篇
结核T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)是基于酶联免疫斑点技术(ELISPOT)发展而来的特异性结核感染检测方法,其核心原理是利用结核分枝杆菌特异性抗原刺激外周血中致敏的T淋巴细胞,通过检测细胞分泌的γ-干扰素(IFN-γ)来判断机体是否存在结核感染。相较于传统结核检测手段,T-SPOT.TB凭借其高特异性、高敏感性及不受卡介苗接种影响的优势,已成为全球范围内结核感染筛查与诊断的重要工具,尤其在免疫功能低下人群的检测中展现出不可替代的价值。
一、T-SPOT.TB的技术原理与核心基础
ELISPOT技术是T-SPOT.TB的核心支撑,其本质是通过捕获单个细胞分泌的细胞因子,实现对特异性免疫细胞的定量检测。该技术的基本流程是将外周血单个核细胞(PBMC)接种于包被有抗IFN-γ单克隆抗体的微孔板中,加入特异性抗原刺激后,致敏T细胞会激活并分泌IFN-γ,这些IFN-γ会被微孔板底部的抗体捕获。随后加入酶标记的二抗与底物,形成可见的斑点,每个斑点代表一个分泌IFN-γ的致敏T细胞,通过计数斑点数量即可判断机体针对结核分枝杆菌的免疫应答强度。
T-SPOT.TB的特异性源于其选用的两种核心抗原:早期分泌抗原靶6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)。这两种抗原均由结核分枝杆菌基因组中的RD1区域编码,而RD1区域在卡介苗(BCG)和大
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