聚合酶链式反应操作与产物解析指南.pptVIP

PCR技术及其应用;目录;;;;;;PCR技术介绍-定义;第9页;第10页;PCR扩增产物可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5端之间，是需要扩增的特定片段。短产物片段和长产物片段是因为引物所结合的模板不一样而形成的，以一种原始模板为例，在第一种反应周期中，以两条互补的DNA为模板，引物是从3端开始延伸，其5端是固定的，3端则没有固定的止点，长短不一，这就是“长产物片段”。进入第二周期后，引物除与原始模板结合外，还要同新合成的链(即“长产物片段”)结合。引物在与新链结合时，因为新链模板的5端序列是固定的，这就等于这次延伸的片段3端被固定了止点，确保了新片段的起点和止点都限定于引物扩增序列以内、形成长短一致的“短产物片段”。不难看出“短产物片段”是按指数倍数增长，而“长产物片段”则以算术倍数增长，几乎能够忽视不计，这使得PCR的反应产物不需要再纯化，就能确保足够纯DNA片段供分析与检测用。;PCR技术介绍;TaqDNA聚合酶（thermusaquaticus);72℃;;第16页;;操作方法;5;电泳缓冲液的配制;电泳;PCR技术介绍;PCR技术介绍;PCR出现假阴性原因分析及处理方案;PCR出现假阴性原因分析及处理方案;PCR出现假阴性原因分析及处理方案;PCR出现假阴性原因分析及处理方案;PCR出