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MTT法测细胞增殖实验报告

一、实验材料与仪器

（一）细胞株

人肝癌HepG2细胞株，由实验室液氮冻存，复苏后采用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM高糖培养基培养，置于37℃、5%CO?的恒温培养箱中传代培养，取对数生长期细胞用于实验。

（二）主要试剂

MTT试剂：购自美国Sigma公司，用磷酸盐缓冲液（PBS）配制成5mg/mL的储备液，经0.22μm滤膜过滤除菌后，4℃避光保存，有效期1个月。

DMEM高糖培养基：美国Gibco公司产品，使用前添加10%灭活胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素，混匀后4℃保存。

胎牛血清（FBS）：澳大利亚Ausbian公司出品，56℃水浴灭活30min后，-20℃分装保存。

胰蛋白酶-EDTA消化液：含0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA，购自北京索莱宝科技有限公司，用于细胞消化传代。

二甲基亚砜（DMSO）：分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司生产，用于溶解MTT甲瓒结晶。

磷酸盐缓冲液（PBS）：自行配制，配方为NaCl8g、KCl0.2g、Na?HPO?1.44g、KH?PO?0.24g，加超纯水定容至1L，调节pH值至7.2-7.4，高压灭菌后4℃保存。

（三）实验仪器

CO?恒温培养箱：美国ThermoFisherScientific公司Forma系列，精准控制温度、CO?浓度和湿度，为细胞培养提供稳