高考生物一轮复习 限时强化练 强化练3　PCR引物的设计、修饰、选择与计算及限制酶、启动子的选择　.pptxVIP

;热点1PCR引物的设计、修饰、选择及相关计算

1.(2026·广东深圳高中调研)利用PCR获得目的基因后，用限制酶EcoRⅠ同时处理目的基因与质粒，拼接后可得到重组基因表达载体，其部分DNA片段如图所示。下列有关引物的分析正确的是();解析引物结合在模板链的3′端，通过PCR获取目的基因时，所选的引物可为引物2和引物3，A正确；

引物结合在模板链的3′端，检测目的基因是否插入质粒且方向是否正确时，应选用引物2和引物4进行PCR，B错误；

若设计的引物与模板不完全配对，可适当降低PCR复性的温度，以便引物与模板链结合，C错误；

DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的3′端连接脱氧核苷酸，D错误。;2.(2026·四川成都开学考试)DNA分子杂交时，常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法，其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。假设在PCR反应的早期10个循环中，扩增产物是双链DNA，当较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。下列说法正确的是();A.若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物Ⅲ

B.进行最初10个循环的目的是将限制性引物消耗完，以保证获得大量的单链DNA探针

C.设计较长的限制性引物与较短的非限制性引物，以便于后阶段通过提高温度来控制产物生成量

D.如果体系中原模板D