高考生物一轮复习 限时强化练 强化练5　基因敲除及同源重组、融合基因与融合蛋白.pptxVIP

;1.(2025·黑吉辽蒙卷，25)香树脂醇具有抗炎等功效，从植物中提取难度大、产率低。通过在酵母菌中表达外源香树脂醇合酶基因N，可高效生产香树脂醇。回答下列问题。

(1)可从中查询基因N的编码序列，设计特定引物。如图1所示，a链为转录模板链，为保证基因N与质粒pYL正确连接，需在引物1和引物2的5′端分别引入和限制酶识别序列。PCR扩增基因N，特异性酶切后，利用连接DNA片段，构建重组质粒，大小约9.5kb(kb为千碱基对)，假设构建重组质粒前后，质粒pYL对应部分大小基本不变。;(2)进一步筛选构建的质粒，以1～4号菌株中提取的质粒为模板，使用引物1和引物2进行PCR扩增，电泳PCR产物，结果如图2。在第5组的PCR反应中，使用无菌水代替实验组的模板DNA，目的是检验PCR反应中是否有________________________的污染。初步判断实验组(从“1～4”中选填)的质粒中成功插入了基因N，理由是_________________________________

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