目的基因获取专家讲座.pptVIP

目标基因准备要分离、改造、扩增或表示基因。编码某种蛋白质研究某基因结构和功效关系研究某基因与疾病关系目的基因获取专家讲座第1页

一、基因基本结构特征一个能转录、翻译结构基因依次包含以下几部分:转录开启区、核糖体识别区、编码区(包含起始密码子ATG、开放阅读框、终止密码子TAG、TAA或TGA)和转录终止区。目的基因获取专家讲座第2页

（一)原核生物基因组成——操纵子启动子：RNA聚合酶识别、结合和开始转录片段；SD区：糖体16SrRNA识别、结合mRNA位置；转录终止子和终止因子：分别指基因或操纵子3’端提供转录终止信号DNA序列；帮助mRNA聚合酶识别终止信号辅助蛋白。原核终止子在终止点之前有一回文结构，转录物形成茎环发夹。目的基因获取专家讲座第3页

基因区：ATG+extrons+introns+TAA（TGA或TAG)转录开启区：编码蛋白开启子(RNA聚合酶Ⅱ识别)可寻找三个保守区：TATAA/TA区（Hogness框)、CAAT框、GC框。转录终止区:真核生物转录终止信号并不清楚。（二)真核生物基因组成目的基因获取专家讲座第4页

二、目标基因取得方法当前克隆目标基因惯用方法有四种方法:化学合成法、cDNA文库法、PCR法和RT-PCR法。目的基因获取专家讲座第5页

将已知序列目标基因利用化学合成方法直接合