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T细胞受体疗法检验规范

一、样本采集与预处理规范

1.1患者样本采集要求

T细胞受体（TCR）疗法的样本采集需严格遵循无菌操作原则，优先选择患者外周静脉血作为采集来源，单次采血量根据患者体重及后续细胞制备需求确定，通常为50-100mL，采血时使用含有EDTA或肝素钠的抗凝管，避免凝血现象影响后续T细胞分离效率。对于外周血T细胞计数低于正常范围的患者，可在临床评估后采用白细胞单采术获取足量单核细胞，单采过程中需持续监测患者生命体征，防止出现电解质紊乱、过敏等不良反应。

采集后的样本需标注唯一识别码，信息涵盖患者姓名、住院号、样本类型、采集时间及抗凝剂种类，样本运输温度控制在2-8℃，避免剧烈晃动，且需在采集后24小时内送达实验室进行处理，若运输时间超过24小时需使用专门的细胞保存液，确保T细胞存活率不低于90%。对于存在感染性疾病的患者样本，需标注生物危害标识，按照三级生物安全标准进行运输和处理，防止交叉污染。

1.2样本预处理操作流程

样本送达实验室后首先进行外观检查，确认无溶血、凝块、渗漏等异常情况后，采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC），离心转速设置为1800-2000rpm，离心时间20-25分钟，温度控制在4℃，离心后小心吸取PBMC层，使用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤2-3次，每次洗涤后离心转速为1500rpm，时间10分钟，去除血小板和红细胞残留。

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