第5章致病菌检验10螺旋体霉形体立克次体及衣原体.pptVIP

五、微生物诊断1.分离培养病料接种易感动物腹腔,分离毒株作鸡胚或细胞培养,结合血清学试验鉴定。2.血清学试验用已知Ag作凝集试验、补体结合试验、中和试验*1.镀银法染色（1）清洗玻片选择光滑无裂痕的玻片，最好选用新的。为了避免玻片相互重叠，应将玻片插在专用金属架上，然后将玻片置洗衣粉过滤液中（洗衣粉煮沸后用滤纸过滤，以除去粗颗粒），煮沸20min。取出稍冷后用自来水冲洗、晾干，再放入浓洗液中浸泡5—6天，使用前取出玻片，用自来水冲去残酸，再用蒸馏水洗。将水沥干后，放入95%乙醇中脱水。（2）菌液的制备及制片：菌龄较老的细菌容易失落鞭毛，所以在染色前应将待染细菌在新配制的半固体牛肉膏蛋白胨培养基斜面上（培养基表面湿润，斜面基部含有冷凝水）。用消过毒的盖玻片切取培养基边缘的小块琼脂放进试管中，注意要轻放并轻轻摇动，将该试管放在37℃恒温箱中静置10min（放置时间不宜太长，否则鞭毛会脱落），让幼龄菌的鞭毛松展开。然后，吸取少量菌液滴在洁净玻片的一端，立即将玻片倾斜，使菌液缓慢地流向另一端，用吸水纸吸去多余的菌液。涂片放空气中自然干燥。要注意的是菌液的含菌数量一定要少!干燥后的处理(1)干燥后用稀盐酸或稀氢氧化钠滴,并立即倾斜玻片,使酸(碱)液流下,并自然干燥.(2)用冲稀的头发顶型剂滴加,处理一到三分钟(具体的要实验才能知道),并自然干燥.