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基因工程上海市曹杨中学庄婧宜专题复习全球糖尿病患者人数排名前十国家情况（截至2015年)1234基因工程基本过程?1.获取目的基因2.目的基因与运载体重组3.重组DNA导入受体细胞4.筛选含目的基因的受体细胞请根据给出的材料,尝试设计通过基因工程生产人胰岛素的方案。1.获取目的基因2.目的基因与运载体重组工具酶：解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、RNA聚合酶、逆转录酶、限制酶（EcoRI、EcoRV、BamHI)。注：限制酶会产生不同黏性末端。运载体:复制原点EcoRIBamHIEcoRV重组质粒胰岛素基因氨苄青霉素抗性基因复制原点EcoRIEcoRVBamHIEcoRVDNA连接酶质粒运载体必须具备的条件具有复制原点，能在宿主细胞中自我复制并稳定保存，使目的基因在受体细胞中复制并稳定存在;多个适宜的限制酶切点，以便装载目的基因;带有标记基因，便于鉴定和筛选。使目的基因与质粒能产生相同的黏性末端;避免目的基因被破坏;避免复制原点被破坏;避免目的基因和质粒的黏性末端自身环化;至少保留1个完整的标记基因。限制酶的选择【练习】1.目的基因和质粒（含卡那霉素抗性基因KmR）上有PstI、SmaI、HindⅢ、AluI四种限制酶切割位点。（