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小干扰RNA检验规范

1.标本采集与处理规范

1.1适用标本类型

小干扰RNA（siRNA）检验适用的临床标本包括静脉全血、血清、血浆、新鲜组织、石蜡包埋组织、体液（脑脊液、胸腹水、尿液）及细胞样本。不同标本类型的采集容器与抗凝剂选择需严格匹配：全血标本优先使用EDTA-K2抗凝管，避免使用肝素抗凝剂，肝素可抑制逆转录酶活性，导致后续荧光定量PCR扩增效率下降30%以上；血清标本需使用无酶促凝管，采集后静置30分钟待血液充分凝固后离心分离；血浆标本离心转速设定为3000g，离心时间15分钟，离心温度控制在4℃，防止RNA降解。

组织标本采集需遵循快速冷冻原则，手术切除的新鲜组织样本需在离体后30分钟内放入RNA保存液中，或直接置于液氮中速冻，长期存储温度需低于-80℃，避免反复冻融。石蜡包埋组织样本需选择切片厚度为5-10μm的连续切片，每次检验使用3-5片，脱蜡过程需严格控制二甲苯浸泡时间，避免RNA交联过度导致提取效率降低。体液标本采集后需立即加入RNase抑制剂，每1mL体液中加入10μL20U/μL的RNaseOut，4℃条件下运输至实验室，24小时内完成RNA提取。

1.2标本拒收标准

存在以下情况的标本需直接拒收：标本采集后室温放置时间超过4小时未处理；抗凝剂使用错误或标本出现明显凝血、溶血现象；组织标本未按要求冷冻保存，出现反复冻融3次以上；标本容器标注信息