基因工程基本技术.pptVIP

PCR动画1stcycle2ndcycle3rdcycle过程变性引物退火DNA复制PCR琼脂糖凝胶电泳最终产物紫外光观察3-4小时PCR仪需要的模板量极低。3.PCR的特点（1)特异性强①PCR使用专门合成的DNA引物。②延伸过程是在高温下进行。（2)敏感性高这就避免了一般DNA聚合酶污染和非引物延伸形成的DNA。提高了反映的特异性。理论上只要一条模板链，32次循环就可合成约109条!RT-PCR:对模板的纯度要求低。（5)可以扩增mRNA（4)简便先用逆转录酶将mRNA合成cDNA,再以cDNA为模板进行扩增。（3)快速整个PCR过程约4小时即可完成。不需要纯化,甚至可以直接用细菌。已固定或包埋的组织切片也可以直接用于作模板。自从H.A.Erilish分离出耐高温的TaqDNA聚合酶，代替大肠杆菌DNA聚合酶Klenow片断(37oC)，PCR技术才进入实用阶段。（1)TaqDNA聚合酶4.影响PCR的因素TaqDNA聚合酶的最大特点是热稳定性,耐高温,非常适合PCR过程的反复高温变性要求。①热稳定性最适温度:75-