埃博霉素的生物合成.doc

埃博霉素epothilones）是由黏细菌纤维素堆囊菌分泌的结构为16元内酯大环为中心体，噻唑环配基为侧链的一类细胞毒性化合物，是一种具有类似紫杉醇微管蛋白聚合和微管稳定作用的新抗肿瘤药物（图1）。 Fig.1 epothilones 作者简介：阎家麒(1939-), 男，教授，专业方向：基因工程制药，天然产物有机合成。 Tel: 013469789911 E-mail: yanjq99@126.com 1 埃博霉素的发现 埃博霉素A和B是在20世纪90年代由H?fle及其同事最先从南非Zambesi河岸的泥土中找到一种黏细菌纤维素堆囊菌Sorangium cellulosum(Myxococcales) 菌株So ce90，从其培养物中分离提取了一种抗真菌活性的化合物并对其进行性质研究[1,2]。首先用光谱和X－射线衍射晶体学方法测定了埃博霉素的结构排布, 该化合物是依据它的结构亚单位，epotide, thiazol 和ketone命名的（图2）。 Fig.2 The naming of epothilones 1995年前后，Bollag等人发现埃博霉素是一种具有类似紫杉醇的促微管蛋白聚合特性、结构新颖的抗肿瘤化合物。这一结果立即引起许多有机化学家、生物学家、药学家及临床医生的极大关注，在国际上迅速开展了对埃博霉素的多角度研究。 2 埃博霉素化学生物学 埃博霉素外观为无色油状，可在乙酸乙酯中形成粉末状结晶。上述埃博霉素A、B、C、D、E 5种分子结构仅存微小差别。埃博霉素总共有7个手性中心和一个大环，包括含有噻唑的侧链与一个环氧化物。 2.1 微管聚合与解聚 微管（microtubule）存在于几乎所有的真核细胞中，是有丝分裂期纺锤体、纤毛及鞭毛基体的主要成分。微管为中空柱状结构，外径约24nm，壁厚约5nm，其长度因细胞种类和功能不同而异。微管由α、β微管蛋白（tubulin）））2.2 以微管或微管蛋白为靶点的药物及其结合位点 埃博霉素、紫杉醇、长春碱（vinblastin）和秋水仙碱(colchicines)都是作用于微管蛋白的天然药物，但它们的结合位点和作用机制不同。 与长春碱结合位点相互作用的药物包括长春新碱、长春碱和长春地辛（vindesine），它们作用于纺锤体微管而抑制有丝分裂，可快速、可逆、温度非依赖性地结合于微管蛋白，每分子的微管二聚体有两个长春碱结合位点，分别具有高亲和性（KD=0.2?0.5μmol/L）和低亲和性（KD=10μmol/L）。但在微管蛋白二聚体上确切的位点尚未被阐明。近年来研究表明，长春碱的结合位点可能位于围绕α微管蛋白第339位和β微管蛋白第390位残基的一级结构中。长春碱可能结合于已聚合的微管上，抑制微管组装，也可能结合于微管多聚体形成凝聚和不全结晶。 与秋水仙碱结合位点相互作用的药物结合于可溶性微管蛋白形成秋水仙碱/微管蛋白复合物，使二者的构象发出改变，然后削弱微管末端的连接键，妨碍下一个微管蛋白分子连接于微管，最后使微管增长停止。研究表明，秋水仙碱结合于微管蛋白，使围绕第39位精氨酸的部分解旋，这一过程使得有丝分裂中期纺锤体微管解聚。秋水仙碱结合于微管蛋白时，A、B、C三个环的分子构象与化学特征需要有严格的结构与空间特征。秋水仙碱分子上的三个甲氧基是保证其完全结合亲和性和抑制微管聚合所必需的。 与紫杉醇结合位点相互作用的药物包括埃博霉素及其衍生物等。这些是另一类抗有丝分裂抗肿瘤药物，具有促进微管的聚合与稳定性的作用。实验研究表明，埃博霉素具有与紫杉醇相类似的稳定微管活性，其作用机制主要是，埃博霉素在低温、无GTP或微管偶联蛋白（MAPs）和在Ca2+存在的条件下与β微管蛋白N端第31位氨基酸和第217~231位氨基酸结合，促进微管蛋白聚合，装配成微管，抑制其解聚，从而导致微管束排列异常，形成星状体，使纺锤体失去正常功能，导致染色体分离受阻，细胞核不能分裂，使得细胞有丝分裂终止在G2-M期，从而引起细胞毒性导致细胞死亡[4]。 有研究认为，埃博霉素A和B是[3H]紫杉醇连接的竞争抑制剂，与紫杉醇具有几乎相同的IC50值，埃博霉素在结合到微管上时，占有不同的但可能是重叠的结合位点。是紫杉醇结合到微管蛋白聚合物的竞争性抑制剂。 与紫杉醇比较，埃博霉素水溶性好，注射、口服均可；结构简单，有利于化学合成及衍生化；在P-糖蛋白表达型的多药耐药性（MDR）细胞中也维持很大的细胞毒性，约为紫杉醇的2000~5000倍[5]。 3 埃博霉素的全合成 与紫杉醇比较，埃博霉素的化学结构相对简单，所以化学合成埃博霉素及其衍生物成为近年来生物有机化学家们关注的热点。埃博霉素是一种结构复杂的天然产物，天然产物的有机合成可谓是20世纪后十年对有机化学巨大挑战。埃博霉素一问世，有数十条全合