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维药菠里克果多糖提取含量测定
(兵团教育部共建新疆特种植物药资源重点实验室,新疆 石河子 832002)摘要:目的:提取菠里克果成熟果实中的多糖,并对该多糖进行含量测定。方法:通过水提醇沉法得到多糖,并用剩余碘量法测定精制后多糖的含量。结果:菠里克果精制多糖中多糖含量56.16%,得率4.52%。结论:方法简便精密度及重现性,
关键:菠里克果多糖 剩余碘量法 含量测定
Determination and traction of Polysaccharide from Capparis spinosa L. Ripe Fruits
ZHANG Yin-ling,CHEN Wen,PENG Xue-qin,HAN Bo,WANG Fu-ying,JIANG Fa-shou
(Key Laboratory of Xinjiang Phytomedicine Resources,Shihezi,Xinjiang 832002,China)
Abstract: Objective To isolate polysaccharide from Capparis spinosa L. ripe fruits and determine the contents of the polysaccharides. Methods The polysaccharide in Capparis spinosa L was extracted with water and ethanol precipitation. Indirect iodometry was applied to analysis of the contents of polysaccharides.Results The content of refined the polysaccharide was 56.16% and yield was 4.5%. Conclusions The method is simple, accurate and reliable, and it can be used to determine the content of polysaccharide.
Key words: Capparis spinosa L.;polysaccharide ;indirect iodometry
菠里克果(Capparis spinosa.L) 为白花菜科山柑属植物又称野西瓜、刺山柑、老鼠瓜、瓜儿菜、槌果藤、伯格塔乌孜等本实验菠里克果多糖测,为步的奠定基础。1 材料与方法
1.1 实验材料
菠里克果成熟果实(购自石河子济仁堂药店);经石河子大学药学院成玉怀教授鉴定为白花菜科山柑属植物菠里克果。
1.2 实验仪器与试剂
仪器:万分之一/十万分之一电子天平(产 ); 旋转蒸发仪(德国Heidolph); 冷冻干燥仪(英国Edwards公司);恒温搅拌器(江苏金华仪器厂);pH计(); 离心机()实验用膜分离仪(天津膜天膜工业公司)。
试剂:95%乙醇,浓盐酸,硫代硫酸钠,I2,三氯乙酸,双氧水(30%),无水乙醇,NaHCO3NaOH,丙酮,石油醚,葡萄糖(均为国产分析纯)。2菠里克果成熟果实中多糖的提取与精制
2.1 菠里克果成熟果实中多糖的提取[]
菠里克果干燥的成熟果实100g除去杂质、粉碎后,用8倍量的5% NaOH溶液回流提取2次,每次1.5h,再用5倍量5% NaOH溶液回流提取1.5h,趁热用纱布过滤,合并滤液得棕黄色的水提液约2000mL,离心去除沉淀用浓盐酸调节pH7.0,进一步减压浓缩100mL左右。待自然冷却后加入95%的乙醇,调节醇终浓度为80%次日用适量的无水乙醇、丙酮和石油醚依次抽洗干燥后得棕灰色的菠里克果粗多糖。2.2 菠里克果多糖的精制
2.2.1 去蛋白
取菠里克果粗多糖5g加水溶解至200mL,加入0.2倍多糖液体积的三氯乙酸(浓度为8%),20℃下反应25min,离心弃去沉淀,得棕色澄清透明溶液。
2.2.2 氧化脱色 [
去除蛋白后的多糖溶液用浓氨水调节pH8.8加入双氧水脱色,用量为多糖溶液体积的40%,40℃水浴脱色4h,得浅黄色澄清透明溶液200mL。2.2.3 膜分离去除小分子杂质
脱色后溶液通过截留分子量5000的实验用膜分离仪,除去小分子物质,浓缩至100mL。2.2.4 醇沉
将多糖液经70℃减压浓缩至25mL,待自然冷却后加5%的乙醇调节醇浓度为80%,离心,弃去上层清液,得灰白色沉淀。
2.2.5 冷冻干燥
用蒸馏水溶解沉淀并清洗离心杯,得约25mL多糖溶液,70℃减压浓缩至5mL,再进行冷冻干燥,得精制菠里克果多糖g。存放于五氧化二磷干燥器中备用。菠里克果多糖的含量测
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