6食品中铁的测定.pptVIP

实验六 食品中铁的测定 一、实验目的 1. 了解食品中铁含量测定的意义与原理； 2. 掌握分光光度计的使用方法及原理； 3. 掌握铁标准曲线的制备方法。 二、基本原理 邻二氮杂菲是测定微量铁较好的试剂。在pH为2~9的溶液中，邻二氮杂菲与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，比色后即可定量。显色反应如下： 三、实验器材 1. 仪器：721分光光度计，1cm比色皿，50mL容量瓶10只，5mL吸液管一支，10mL吸液管一支，200mL烧杯2 只，洗瓶一只。 2. 试剂： （1）盐酸羟胺溶液(100 g/L)：称取100 g盐酸羟胺，用水溶解并稀释至1000mL； （2）盐酸：1：1和1：9溶液； （3）乙酸钠溶液(450g/L)：称取45g乙酸钠,加水溶解并稀释至100mL； （4）0.2%邻二氮杂菲：称取0.20g邻氮二杂菲于烧杯中，加60mL水，加热溶解(不超过80℃)，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀； （5）铁标准贮备液(1mL溶液含有0.1 mg铁)：准确称取0.8634g分析纯NH4Fe(S04)2·12H2O于200mL烧杯中，加入20mL 6mol/L HCl和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀； （6）铁标准使用液(1mL溶液含 2μg铁)： 吸取铁标准贮备液20.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，此溶液每毫升含0.02 mg铁，吸取铁标准贮备液10.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，此溶液每毫升含2μg铁。 四、操作步骤 1. 样品的处理： （1）干法：吸取25.00mL 试样(V)于蒸发皿中,在水浴上蒸干,置于电炉上小心炭化，然后移入 550±25℃高温电炉中灼烧,灰化至残渣呈白色,取出,加入10mL1＋1盐酸溶解，在水浴上蒸至约2mL，再加入5mL水加热煮沸后,移入50mL容量瓶中，用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶，加水稀释至刻度(V2)，摇匀。同时做空白试验。 （2）湿法：吸取25.00mL试样(V)于250mL 定氮瓶中，小火加热除去酒精，放冷，加入10mL浓硝酸及5mL浓硫酸，瓶口盖上小三角漏斗，放置浸泡过夜。然后放入几颗玻璃珠加热消化(或直接加热消化)，直至泡沫消失，液体成棕色后，再加大火力，同时沿瓶壁滴加浓硝酸，直至产生白烟，溶液澄清透明或微带黄色，静置放冷。再加20mL水煮沸，除掉残余的硝酸至产生白烟为止。如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入50mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，加水至刻度(V2)，混匀。同时做空白试验。 注：样品的处理各实验室可根据各自条件选用（1）或（2）法。 2. 标准曲线的制作： 吸取铁标准使用液0.00,1.00,2.00,3.00,4.00及5.00mL(含0.0,2.0, 4.0,6.0,8.0及10.0μg铁)分别于六支50mL比色管中，补加水至25mL，加1mL 1：9盐酸溶液、1mL盐酸羟胺溶液、5mL乙酸钠溶液及1mL邻二氮杂菲溶液，然后补加水至50mL，摇匀，以零管调零，在510nm波长下，分别测其吸光度。根据吸光度及相对应的铁浓度绘制标准曲线。 3. 测定： 吸取样品处理液5－10mL(V1)及同量试剂空白液分别于50mL比色管中，补加水至25mL，加入1mL 1：9盐酸溶液、1mL盐酸羟胺溶液，用乙酸钠溶液调pH至3－5(须作预试验)，再加1mL邻氮二杂菲溶液，补加水至刻度。然后按标准测定同样操作，分别测其吸光度，从标准曲线上查出铁的含量(或用回归方程计算)。 3. 结果计算： 式中： X ——试样中铁的含量，mg/L； c1——测定用样品处理液中铁的含量，μg； c0——试剂空白液中铁的含量，μg； V ——取样体积，mL； V1——样品处理液的体积，mL； V2——测定样品处理液的总体积，mL。 所得结果应表示至一位小数。 五、实验分析与讨论 1. 邻二氮杂菲分光光度法测定铁的适宜条件是什么？ 2. 显色前加盐酸羟胺的目的是什么？如测定一般铁盐的总铁量，是否需要加盐酸羟胺？ 3. 如用配制已久的盐酸羟胺溶液，对分析结果将带来什么影响？ 4. 溶液的酸度对邻二氮杂菲铁的吸光度影响如何？为什么？ 5. 使用分光光度计时应注意哪些问题？ * * N N Fe N N 3 2+