灿烂甲酚蓝褪色分光光度法测定肌苷.docVIP

【标题】灿烂甲酚蓝褪色分光光度法测定肌苷 【作者】韦 远 生 【关键词】肌苷??紫外分光光度仪??波长 【指导老师】王 祥 洪 【专业】化学 【正文】1?前言肌苷是一种适应性较广的药品目前已经被中国药典所收录。别名：次黄嘌呤核苷、9-D-核糖次黄嘌呤、又称次黄苷。英文名称：(Insoine tabies)；缩写形式Insoine.?分子式（C10H12N4O5）分子量（268.23）。是嘌呤核苷酸合成的前体，肝脏和肌肉中含量较高。其结构式如图1????????????????图1?肌苷的结构式肌苷的相关性质：物理性质，?熔点：212-213℃。比旋光度：-49.2℃（H2O 18℃,C=1）。水溶性（2.1g/100Ml20℃）。白色结晶性粉末，微溶于水、稀盐酸、氢氧化钠溶液，极微溶于醇。无臭、味微苦。化学性质，肌苷分子中核糖苷部分含有一对顺式羟基易被氧化，且在高温条件下容易分解为次黄嘌呤。肌苷的药理作用：该产品几乎无毒性和副作用，主要用于各种类型的肝疾病、心疾病、白血球减少症、血小板减小、中心性视网膜炎以及预防和解除锑剂引起的副作用。?也可用于心脏疾患及急慢性肝炎。还可用于抗血吸虫药物引起的心脏或肝脏毒性反应。以及用于急、慢性肝炎、慢性迁延性肝炎、肝硬化的辅助治疗。并能直接透过细胞膜进入人体细胞，使处于人低能，缺氧?状态下的细胞顺利的进行代谢，还能活化丙酮酸氧化酶类，参与人体蛋白质的合成。且具有提高各种酶特别是辅酶A的活性及改善抗体代谢作用，还可以用其合成多种药用核苷类物质。主要用于治疗以下疾病：急慢性肝炎、肝硬化、肝腹水、肝功能衰竭、肝昏迷，?心肌梗塞、心肌炎、冠心病、心功能衰竭、脑梗塞、脑外伤、神经系统疾病等，急慢性肾炎、肾结石、肾病综合症、肾功能衰竭、肾移植术，视网膜炎、角膜炎、视神经萎缩、急慢性鼻炎、耳鸣、中耳、神经性耳聋，各种慢性消耗性疾病的营养支持治疗，大面积创伤的修复，??贫血，白细胞及血小板减少症，各种肿瘤术后，放疗和化疗，?促进生长和抗衰老，治疗各种疾病引起的免疫功能低下?，银屑病、药疹、流行性出血热等。目前国家标准法采用高效液相色谱法对肌苷含量进行测定，国内外对肌苷研究现状：高效液相色谱法[1]，由于肌苷在酸性和高温条件下易分解为次黄嘌呤，采用灵敏专属的高效液相色谱法稳定可靠、精密度高、重现性好。采用该方法考核肌苷注射液的有关物质和生产工艺是可行的，能有效控制肌苷注射液产品质量；高效毛细管电泳法[2]，?该方法要求较高，工作电压、电流、温度这些要素都必须充分考虑，电泳条件也比较苛刻，要测定电流-电压关系曲线、不同电压对容量因子k′的影响、缓冲液中其他组分之浓度对分离效果的影响等步骤。过程较为烦琐；?高碘酸滴定法[3]；该方法是用硫带硫酸钠滴定液滴定，临近终点时加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失。然后将结果用空白实验做校正。结果本法与部颁标准测定结果相差无几。说明该方法测定肌苷含量方法简便快捷，终点变色灵敏，测定效果准确可靠；离子交换法[4-5]，经过对不同类型阳离子交换树脂的静态和动态吸附和解析性能比较，确定肌苷分离的最佳条件，再通过装柱量的测定、洗脱液洗脱体积以及流速的确定可以得到肌苷的最佳分离效果。再对其测定紫外吸收值。离子交换法不需要特殊的仪器，只要具备紫外分光光度计的实验室和工厂都可，且测定效果较好；肌苷在玻璃电极上的伏安法研究[6]，通过对肌苷在玻碳电极上的伏安行为研究，其在0.1moL/L的磷酸二氢钠溶液中于1.42伏左右产生一个阳极氧化峰，峰电流于肌苷浓度在一定范围内呈线性关系，峰电位随ph变化。实验结果表明肌苷的惦记反应为扩散控制不可逆过程；紫外分光光度法[7]紫外分光光度法测定肌苷以0.01moL/LHCL溶液作为介质，在248nm处测定其吸收度。紫外分光光度法准确可靠，能满足质量控制的要求，且操作简便；酶电极法测定肌苷含量[8]，该法以固定化核苷磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶与过氧化氢电极构成电流型酶电极，研究了肌苷酶电极分析法的各种分析条件及参数，并与紫外分光光度法作对比测定了注射液中肌苷的含量，二者之间有较好的一致性。该方法有专一性高、成本低、分析速度快等优点。。由于肌苷具有以上诸多药用价值，在临床医疗上应用前景相当可观。因而研究该药品的相关性质及其在医疗上的创新应用有重要意义。2实验部分2.1主要试剂与仪器肌苷对照品（中国药品生物制品检定所）标准溶液：10μg?mL-1，冰箱保存；灿烂甲酚蓝(Brilliant Cresyl blue以下简称(BCB)，2.5×10ˉ4mol?L-1水溶液。BR缓冲溶液：用0.04mol?L-1 H3PO4，H3BO3和CH3COOH与0.2mol?L-1 NaoH溶液按一定比例混合，配成不同pH值的缓冲溶液，并