产黄青霉产青霉素的研究进展.docVIP

【标题】?产黄青霉产青霉素的研究进展 【作者】罗 娜 【关键词】产黄青霉?青霉素?基因工程?代谢途径?代谢流量控制 【指导老师】周先容 【专业】生物 【正文】1?引言在提高整个人类健康水平方面，对细菌病原体所引起的感染病控制无疑是人类最重要的医学成就之一。其中最重大的事件是七十多年前青霉素列入临床应用。这一成就使美国公民的平均预期寿命大约增加十年。当今，尽管可利用的其他抗菌药物的品种在不断增加，但以许多青霉素及结构上相关的头孢菌素为代表的?-内酰胺类抗生素仍然是领先的最常用的抗菌药物。这一族抗菌药物在临床应用上的绝对优势，不仅刺激了工业生产而且也刺激了学术研究部门致力于研究?-内酰胺类的生物合成。用发酵法工业化生产青霉素是过去几十年来工业生物技术发展的一个重大事件。自青霉素列入临床之后，数十年以来，为了提高青霉素发酵水平，把注意力主要放在青霉素生产菌种——产黄青霉的筛选与改造上。在此期间，通过随机诱变和筛选策略使产生?-内酰胺的丝状真菌抗生素生产能力提高了几百倍。历史上，随机诱变和筛选优良菌株都是根据经验进行的。1995年之后，发展了更合理的筛选技术。例如：筛选作为?-内酰胺生物合成的前体或刺激剂的氨基酸类似物的抗性突变株，和与产黄青霉产生的抗生素络合的金属（汞或铜）离子抗性突变株。此外，应用原生质体融合法也已成功地获得了改良菌株。这些研究不仅阐明了产黄青霉产青霉素的生物合成途径，而且也证实了青霉素的产量已有所提高。20世纪70年代，重组DNA（rDNA）技术的出现，使生物体的基因操作进入了更精确的阶段。这种操作的一个先决条件是：在感兴趣的生物体内，需具有转化和表达特定DNA片段的能力。1978年，在面包酵母——酿酒酵母中开发了第一个真菌转化系统。这些实验所确定的条件有助于产黄青霉的基因转化系统的发展。自1985年以来，分子生物学在产生?-内酰胺的真菌上的应用取得了迅速的发展。由重组DNA技术所提供的新的手段，不仅很快使菌株得到进一步改良，而且还建立了在体内和体外产生被修饰抗生素的新方法。近年来，随着现代生物技术的日益发展，尤其是基因工程和代谢工程技术，已经取得了引人注目的成果。然而，对于产黄青霉产青霉素的研究进展，目前还没有看到相关的论文对它进行系统地、综合地论述。所以，本文将对它作一定的总结，以便为今后的研究提供参考。2?青霉素的概况2.1?青霉素的发现青霉素是第一种现代的、能够治疗人类疾病的抗生素，而且是最有效的抗生素之一。最早于1929年被英国科学家弗莱明所发现。1935年由英国物理学家弗洛里和英国牛津大学生物化学家钱恩提纯并应用于临床。2.2?青霉素的特征青霉素是一类结构相似的?-内酰胺类抗生素。它们的性质及活性稍有不同，但都具有如下的特征：（1）具有破坏或抑制许多不同种类的病原微生物的能力，也就是具有“广谱”性；（2）阻止抗性寄生物的迅速产生；（3）不使寄主产生不良效应；（4）不应消除宿主体内正常的微生物区系，否则，就可能扰乱“自然平衡”而使正常的、不致病的微生物或者那些被正常区系所抑制的特殊致病性类群繁衍，导致新的感染。????所有的青霉素都具有一个共同的母核—个骈合的?-内酰胺—噻唑环（6-APA），其上带有不同的侧链，各种青霉素具有它独特的性质，在同一发酵生产中可生物合成几种不同的青霉素[1]。??????????????3?产黄青霉(P.chrysogenum)3.1?产黄青霉的形态结构产黄青霉属于子囊菌亚门的青霉属(penicillium),菌丝与曲霉相似。青霉属的营养菌丝体具有横隔，菌丝体穿入基质并产生气生菌丝，分生孢子梗在气生菌丝上产生。分生孢子梗可以分枝形成能产生孢子的扫帚状头部，簇生的小梗一般是在一定的位置，从每个小梗形成分生孢子链，分生孢子梗基部无足细胞[2]。?图3.1???青霉属的分生孢子梗和分生孢子3.2?产黄青霉的培养产黄青霉作为霉菌的一种，它们在普通细菌培养基上生长几乎全都需要氧，其生长所需要的温度范围从20℃到30℃不等。大多比细菌生长慢，以致于在可供细菌和霉菌生长的培养基上混合接种时，将被细菌长满。所以，好的办法是使用一种适合霉菌生长，但不适合细菌生长的培养基来分离霉菌。例如：糖浓度较高的酸性（pH5，6）培养基为霉菌所能忍受，但很多细菌被抑制。供产黄青霉生长的培养基有三种普通类型：(1)天然培养基，如：水果、蔬菜、谷物或者动物组织的碎片或浸汁，这样的培养基组成变化很大，而不能准确地再复制，使用不广泛。(2)由蛋白胨、植物浸出油、琼脂和其它的成分不明或组成不恒定的混合物制备的培养基。(3)合成的或者化学成分明确的培养基，如：PDA培养基（由马铃薯浸出液、琼脂和葡萄糖组成）。4?青霉素的生物合成与代谢调控4.