树突状细胞体外刺激对HBV特异性细胞毒T细胞影响的研究.pptVIP

树突状细胞体外刺激对HBV特异性细胞毒T细胞影响的研究 张恒辉 何豫 赵鸿 朴文花 刘茂昌 席宏丽于敏 王贵强 北京大学第一医院感染疾病科 研究背景 研究背景（1） 研究背景（1） 关于恢复DC功能的研究 研究目的 本研究通过在体外进行慢性乙型肝炎患者单核细胞的DC方向转化，并辅以聚肌胞Poly(I:C)刺激，增强DC的成熟和功能。 将患者DC经HBV core18-27肽负载后，刺激病人自身的T淋巴细胞。并用Elispot法及本研究室构建的HLA-A2肽四聚体复合物检测病毒特异性T淋巴细胞的数量和功能。 研究对象和方法 研究对象 22例HLA-A2+慢性乙型肝炎患者。 HBeAg+患者16例、 HBeAb+患者6例。HBV DNA 均≥104 copy/ml。 排除HCV、HAV、HDV、HEV感染。近半年没有接受过抗病毒治疗。 研究方法 HLA-A2型别鉴定 DC的体外培养扩增及鉴定 以树突状细胞为抗原递呈细胞体外诱导病毒抗原特异性T细胞 Elispot检测分泌IFN-γ的T细胞频数 MHC-肽四聚体检测 HBVcore18-27 肽特异性CD8 + T 细胞 HLA-A*02型别鉴定 外周血淋巴细胞标记鼠抗人HLA-A02单抗； 流式细胞仪检测； 每份标本均设自身阴性对照。 树突状细胞的体外培养扩增及鉴定 分离病人PBM