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864-果蝇作为一种重要的模式生物,在遗传学与基因组学的研究及发展中发挥.ppt
果蝇作为一种重要的模式生物,在遗传学与基因组学的研究及发展中发挥了无可替代的作用。 果蝇实验,对于培养高等学校和中等学校学生的遗传学实验技能,具有十分重要的意义。 果蝇大实验 经典遗传学分析 分离/组合/连锁/伴性/基因定位 染色体遗传学分析 唾腺染色体制备与观察/各地果蝇核型分析 分子遗传学分析 P-转座子分析 数量遗传学分析 体重/体长/刚毛数量的遗传力估算 毒理遗传学分析 Muller-5 检验 发育遗传学分析 Bit./Ant. 分析 进化遗传学分析 正常翅-残翅基因的自然选择 江苏地区野生果蝇的适合度比较 …… …… 【实验内容】 【实验目的】 熟悉果蝇的形态特征、生活史及各种突变性状,学会野生果蝇的采集与实验果蝇的饲养管理。 掌握果蝇的杂交技术,以果蝇为实验材料,体验分离、自由组合、伴性遗传和连锁互换规律的遗传学分析过程,学会分析方法。 熟练掌握果蝇唾腺的剥制及唾腺染色体标本的制作方法,熟悉果蝇唾腺染色体的形态特征。 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) ——最著名的模式生物 果蝇科:全世界3000多种 中国约800多种 Drosophila melanogaster 的分类地位: Class: Insecta Subclass : Pterygota Order: Diptera Family: Drosophilidae Genus: Drosophila Species: melanogaster Drosophila melanogaster 特点: 体积小 繁殖力强 世代周期短 容易饲养 染色体数目少,巨大的唾腺染色体 突变体多,P-element,…… 遗传背景清楚(基因组测序完成) 一、野生果蝇采集与生活史观察 野生果蝇采集: 取洁净敞口容器,放入适量果皮(葡萄皮最佳,取皮前用清水稍稍冲洗),置户外阴凉处数天,见有小小的金黄色虫子(果蝇)在其内飞翔,即可用透气的材料覆盖容器口。采集完成 观察作业: 写出详细的果蝇生活史观察日记 二、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的雌雄鉴别和突变体观察 Fem Mal 体形 腹部条纹数 尾端形状 尾端条纹 外生殖器形状 性梳 黑腹果蝇突变体观察 性状分类 名称及代号 表型特征 基因所在染色体 体色 黑檀体(ebony) e 体乌木色 Ⅲ 灰体/野生型 + 体灰色/金黄色 Ⅲ 翅形 短翅(miniature)m 双翅短小与尾端等长 Ⅹ 长翅/野生型 + 双翅长过尾端 Ⅹ 残翅(vestigial) vg 翅极小,仅残迹 Ⅱ 眼色 白眼(white) w 复眼白色 Ⅹ 红眼/野生型 + 复眼红色 Ⅹ 刚毛形状 焦刚毛, sn3 刚毛弯曲烧焦状 Ⅹ 直刚毛/野生型 + 刚毛尖直 Ⅹ 黑檀体(e)突变体 三隐性(w m sn3)突变体 果蝇突变体观察 三、黑腹果蝇的饲养及管理 1、黑腹果蝇的“培养基”配置 果蝇以酵母菌为食。凡能培养酵母菌的基质,都可用作果蝇的“培养基” 。常用的有玉米粉培养基、米粉培养基、香蕉培养基等。配方如下页表: (1)果蝇培养基的几种配方 玉米粉饲料 米粉饲料 香蕉饲料 水(ml) 200 100 50 琼脂(g) 2 2 1.6 食糖(g) 13 10 — 香蕉浆(g) — — 50 玉米粉(g) 17 — — 米粉(g) — 8 — 麸皮(g) — 8 — 丙酸(ml) 1 1 0.5-1 酵母粉(g) 适量 适量 适量 (2)玉米粉培养基配置方法 i)取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,再加糖,煮沸溶解; ii)取另一半水混和玉米粉,加热,调成糊状; iii)将上述两者充分混匀,煮沸(以上操作都要搅拌,以免沉积物烧焦) ; iv)将所得培养基分装入指形管或培养瓶(厚度2 cm),勿沾染管口/瓶口. 加塞、包扎,高压灭菌。 Ⅴ)稍冷后取出,直立、冷却。在洁净空间打开瓶塞,用酒精棉球擦干管壁/瓶壁上的冷凝水滴,加入适量丙酸及酵母粉,即可投入果蝇进行饲养。 2、果蝇的麻醉处理 对果蝇的观察与检查,均在其麻醉昏迷状态进行。 1)将果蝇转移到洁净干燥的麻醉瓶中。向麻醉瓶的棉塞底部滴加乙醚
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