混合脲酶抑制剂对茎瘤芥土壤脲酶活性的影响.doc

【标题】混合脲酶抑制剂对茎瘤芥土壤脲酶活性的影响 【作者】何 玮 【关键词】茎瘤芥?土壤脲酶?活性?浓度?脲酶抑制剂 【指导老师】李昌满 【专业】生物科学 【正文】1?引言1.1?土壤脲酶土壤脲酶是土壤酶中的一种，它分布于一切土壤中[1]。它是一种促氮有机物的水解酶类，能专一性地水解尿素，同时释放氨和二氧化碳。在脲酶的作用下，尿素被分解为植物可利用的物质，从而提高土壤的肥力[2]。土壤脲酶是一种由简单蛋白质构成的生物催化剂，一般认为是由土壤中的微生物产生的，是存在于土壤中能催化尿素分解、具有氨化作用的高度专一性的一类好气性水解酶。土壤脲酶在性质上有别于从生物体内分解出的纯脲酶，而且土壤脲酶只对尿素起催化作用，对尿素的其他衍生物不起作用[2]。植物不能直接吸收施入土壤的尿素分子，只能吸收尿素分解后的无机离子氨(NH4+)及进一步分解的硝态氮。尿素在脲酶的作用下水解为氨基甲酸胺，氨基甲酸胺进一步水解为碳酸氨[3]，碳酸氨再进一步分解为氨和碳酸氢氨。氨在浅土层和地表层容易以气态挥发进入大气，而NH4+则有四种可能流向：一是被土壤中的胶粒吸附；二是被植物吸收；三是在好氧条件(环境含氧气充足)下发生硝化反应，转化为硝态氮(NO3-、NO2-、NO)；四是在缺氧条件(环境含氧量较低)下发生反硝化反应，脱氮生成N2。硝态氮虽然也能被植物吸收，但是更容易被降雨冲失，进入地下水中[3]。土壤脲酶活性是影响尿素分解的最主要因素，气温高，脲酶活性强，尿素分解快，分解产物来不及被农作物吸收就挥发掉或随地下水流失；温度低，尿素分解慢，分解产物还有可能供不上农作物的需要，尿素的利用率大大降低。另一方面，过量施用肥料尤其是无机肥，或者偏施某一种肥料，不重视合理配比，均会导致局部地区严重的生态环境问题，如地下水硝态氮含量的超标。但如果使用得当，对蔬菜的产量与品质都有好的影响，更不会造成环境生态污染和食品安全问题。配合尿素施用，加入适量的脲酶活性抑制剂(称缓释剂)是提高尿素有效性的重要途径。目前在国内外市场上常用的脲酶抑制剂有：氨基酸盐、含硼化合物、尿素衍生物、分子量大于50的重金属盐类、化合物、多元酚、多元醌、抗代谢化合物、磷酸胺盐、有机酸类、金属离子络合物、还原剂等?[4]。1.2?国内外研究现状早在1844年，Liebig?就在《化学通讯》中提到了这种催化作用。关于土壤酶的研究历史可以追溯到19世纪末Woods发现过氧化氢酶，并指出它来源于植物腐解。Ksnig，May和Gile曾正式测定过氧氢酶的活性。1910年Femi曾检测土壤中的蛋白酶和当时已知的其他酶，以后脱氨基酶，磷酸酶和脲酶等相继被检测出来[4]。首先指出土壤中存在脲酶的是Rotini(1935)。Ｃonrad(1940，1941，1942)随后的开拓性工作，提供了土壤中含有脲酶的令人信服的证据。Ｂremner与Ｄouglas(1973)研究了八种脲酶抑制剂(苯邻二酚，氢醌，p－苯醌，２，５－二甲基－p-苯醌等)对尿素氮在土中的转化的影响。他们发现，在这些化合物中，２，５－二甲基－p-苯醌具有最大的，延缓土壤尿素的水解和减少尿素氮以氨的形式的损失能力。根据近几年国外学者对脲酶抑制剂的有关论述，早在40年代初期就发现土壤中脲酶的存在，并揭示了土壤溶液中尿素的水解可能受到化学作用的抑制[4]。现今国内外现已发现的脲酶抑制剂有机和无机化合物有几百种：有重金属盐类，多元酸和醌类：即主要有氢醌，P一苯醌，2，5一二氯一P一苯醌，氯化汞，2，6一二氯一P一苯醌，硫酸银，1，2一苯醌，2，5一二甲基一 P一苯醌，硼酸，腐植酸，硼砂，甲醛，多元酚。这些化合物中抑制脲酶的效果各不相同，效果好的可达74%，抑制效果弱的约30%左右，但具备高效、低廉，无毒，无污染者甚少。无机化合物中抑制效果最好的是Ag盐和Hg盐，其次是Cu盐。二元酚类及醌类是最有抑制效果的有机化合物，进一步的研究发现，磷酸胺类化合物，特别是N一丁基硫代磷酸三胺和苯基磷酸二胺对于抑制尿素肥料在土壤中的水解较氢醌或P一苯醌更为有效。氢醌因其成本较低，在我国也受到了极大的关注[5]。醋酸苯汞、硼酸、甲醛的抑制效果也好，三者之中醋酸苯汞的抑制效果最好，但由于它含有重金属汞元素，在农业上应用可能对土壤造成汞污染，故生产上不应选用它作为脲酶抑制剂[6]。而硼酸和甲醛用于农业生产比较好，硼酸在酸性土壤中的主要形态是H2BO3-，有效性高，而南方的酸性土中硼较缺乏，若以硼酸作为脲酶抑制剂施人土中，不仅可以抑制脲酶活性，提高尿素的肥效，而且可以解决土壤缺硼的问题。当然硼含量过多对作物生长不利，但H2BO3-溶于水易流失，不会在土壤中积累。因此，一般不会造成对作物的毒害。在碱性土壤中硼易被固定，有效性低也不会对作物造成毒害