硫酸铜对土壤脲酶的抑制机理研究.docVIP

【标题】硫酸铜对土壤脲酶的抑制机理研究 【作者】彭兴军 【关键词】脲酶?抑制剂?硫酸铜?动力学参数 【指导老师】李昌满 【专业】生物科学 【正文】1引言1.1?土壤脲酶及抑制剂脲酶，是分类名称为尿素胺基水解酶的一些酶的通称。它是一种作用于线型酰胺的C-N键(非肽)的水解酶。这种酶能将尿素水解成二氧化碳和氨[1]。尿素由于具有含N量高，使用方便，2O世纪 8O年代以来已经成为我国农业应用的主要 N肥之一[2]。植物不能直接吸收施入土壤的尿素分子，只能吸收尿素分解后的无机离子铵(NH4+)及进一步分解的硝态氮。尿素在脲酶的作用下水解为氨基甲酸胺，氨基甲酸胺进一步水解为碳酸氨，碳酸氨再进一步分解为氨和碳酸氢氨。一般情况下，尿素在土壤中很快被脲酶分解成氨，高浓度的氨易于损伤作物和挥发损失，致使尿素的利用率通常只有 30％?～40％，且肥效期只有 5O天左右[3]。脲酶抑制剂是能够抑制土壤脲酶活性的一类物质的总称，在尿素中加入脲酶抑制剂是近 l0年来研究出来的新技术。使用土壤脲酶抑制剂可有效地减缓尿素分解成氨的酶解过程，延长施肥点处尿素的扩散时间，由此降低土壤中NH+4?和 NH3的浓度[4-5]，使土壤供肥和作物需肥同步。因此，应用土壤脲酶抑制剂对节省尿素肥料用量、提高作物产量、减少环境污染等均有好处，是一种可持续的农业生产技术[6-8]。能够抑制土壤脲酶活性的有机物和无机化合物有许多种，其主要是对脲酶催化过程中起重要角色的巯基发生影响。无机化合物中抑制效果最好的是Ag和Hg盐，其次是Cu盐。本研究利用CuSO4作为抑制剂对土壤脲酶的抑制机理作研究。1.2?国内外研究现状关于土壤酶的研究历史可以追溯到19世纪末Woods发现过氧化氢酶，并指出它来源于植物腐解。Ksnig，May和Gile曾正式测定过氧氢酶的活性。1910年Femi曾检测土壤中的蛋白酶和当时已知的其他酶，以后脱氨基酶，磷酸酶和脲酶等相继被检测出来。首先指出土壤中存在脲酶的是Rotini(1935)。Ｃonrad(1940，1941，1942)随后的开拓性工作，提供了土壤中含有脲酶的令人信服的证据。Ｂremner与Ｄouglas(1973)研究了八种脲酶抑制剂(苯邻二酚，氢醌，p－苯醌，２,５－二甲基－p-苯醌等)对尿素氮在土中的转化的影响。他们发现，在这些化合物中，２,５－二甲基－p-苯醌具有最大的，延缓土壤尿素的水解和减少尿素氮以氨的形式的损失能力?[9]。根据几年来国外学者对脲酶抑制剂的有关论述。早在４０年代中期就揭示了土壤中尿素的水解可能受到化学作用的抑制。然而直到70年代，当研究出一种快速评价脲酶活性抑制化合物的方法后，才有可能对大量化合物抑制土壤中尿素水解的效果给予评价，能够抑制土壤脲酶活性的有机物和无机化合物有许多种，其主要是对脲酶催化过程中起重要角色的巯基发生影响。无机化合物中抑制效果最好的是Ag和Hg盐，其次是Cu。据Bremner的报导，早期的研究者对百余种化合物的测试发现二元酚及醌类如氢醌、苯邻二酚和P-苯醌是较有效的有机化合物。氢醌（HQ）因其成本较低具有特殊的应用前景。进一步的研究表明膦酸胺类化合物，特别是N-丁基硫代磷酰三胺（nBPT）和苯基磷酰二胺（PPD）对于抑制尿素肥料在土壤中的水解较氢醌或P-苯醌更为有效。在过去的10年中，对脲酶抑制剂大部分研究多集中在磷铵类化合物，主要是nBPT和PPD。然而，HQ也在中国受到了应有的关注[10]。醋酸苯汞、硼酸、甲醛的抑制效果也好，三者之中醋酸苯汞的抑制效果最好，但由于它含有重金属汞元素，在农业上应用可能对土壤造成汞污染，故生产上不应选用它作为脲酶抑制剂。而硼酸和甲醛用于农业生产比较好，硼酸在酸性土壤中的主要形态是H2BO3-，有效性高，而南方的酸性土中硼较缺乏，若以硼酸作为脲酶抑制剂施人土中，不仅可以抑制脲酶活性，提高尿素的肥效，而且可以解决土壤缺硼的问题。当然硼含量过多对作物生长不利，但H2BO3-溶于水易流失，不会在土壤中积累。因此，一般不会造成对作物的毒害?[11]。我国对土壤酶的研究始于20世纪60年代初期，主要研究土壤酶与土壤微生物的关系、耕作技术对土壤酶的影响及土壤酶与植物生长的关系，仅发表少量研究报告[12]。郝奎、赵树魁?[13]等研究的新型尿素缓释剂对甜菜产量的影响。探讨了在甜莱栽培中施用新型尿素缓释剂对其产量的影响。试验结果表明：尿素缓释剂通过对土壤脲酶活性的抑制作用，减少了尿素氮的损失，提高了尿素的肥效，促进了甜菜的生长发育，提高了甜菜产量，经济效益显著。土壤脲酶的活性随着HQ(氢醌)用量的增加而减弱[14]。李双霖[15]等筛选出氢醌、醌、硫酸铜等l0种对土壤脲酶活性有较高抑制能力的物质。许多二价金属阳离子都对脲酶具有抑制作用。但