【毕业论文】亚甲基蓝共振瑞利散射法测阿莫西林的含量.doc

【标题】亚甲基蓝共振瑞利散射法测阿莫西林的含量 【作者】张秀菊 【关键词】阿莫西林??亚甲基蓝??共振瑞利散射 【指导老师】江 虹 【专业】化学 【正文】1引言阿莫西林(Amoxicillin?羟氨苄青霉素)?是一种广谱的半合成青霉素类抗生素药物,属于β-内酰胺类抗生素，其作用较氨苄青霉素强，对溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉菌、破伤风杆菌、棱状芽孢杆菌、革兰氏阳性、阴性菌等有较强的抑制作用，阿莫西林通过抑制细菌细胞壁合成而发挥杀菌作用，可使细菌迅速成为球状体而溶解、破裂；但对于过敏者和少数人群会产生恶心、呕吐、腹泻、皮疹、贫血、血小板减少等不良的反应，偶见兴奋、焦虑、失眠、头晕以及行为异常等中枢神经系统症状，?临床应用广泛。近年来的研究表明,阿莫西林的药效与剂量密切相关,通过研究阿莫西林对不同疾病的量效关系,找出其对不同疾病的最适剂量,必将能够扩大这类药物的临床应用,因此，对阿莫西林药物进行分析研究，对临床上更好和更合理的使用阿莫西林，具有极其深远的意义。目前，阿莫西林的测定方法主要有高效液相色谱法[1]、生物效价法[ 2-3?]??、碘量法[ 4?]??、极谱法[5?]、旋光法[ 6]、流动注射化学发光法[ 7-8?]、???比色法[9]、红外分光光度法[10]、荧光法[11-12]、紫外分光光度法[13-15]、共振瑞利散射法[16]等。生物效价测定法是利用抗生素对微生物的抑杀作用进行的,以藤黄八叠球菌为试验菌种,试验培养基为药典Ⅰ号培养基,来测定血清中的阿莫西林含量,为临床用药和药物评价提供参考依据。此法操作简便,费用低,适用于基层大规模筛选,但工作量极大,大多实验室使用的可行性不高。碘量法是青霉素类抗生素通用的含量测定方法，利用青霉素分子不消耗碘,其降解产物青霉噻唑酸消耗碘的性质建立的。实验要求不高利于普及，但此方法欠缺专属性。旋光法根据阿莫西林结构中含手性碳原子,具有旋光性的特点采用旋光法,?绘制工作曲线进行测定。方法操作简便、适合药厂对本品快速分析，但不能运用于精确研究。流动注射化学发光法是阿莫西林在硫酸溶液中的降解产物含有巯基,可与Ce(Ⅳ)在罗丹明6G的增敏作用下,产生较强的化学发光,建立的分析法。方法灵敏度高，线形范围宽，可排除药物赋形剂的干扰，但选择性差，普及性差。极谱法在NH3?H2O-NH4Cl?支持电解质中,Cu(Ⅱ)-阿莫西林的配合物产生灵敏的极谱吸附波建立的测定方法，此方法利用药物与无机离子配合作用建立的快速检测方法，但其利用仪器多不易普及。红外分光光度法应用漫反射红外光谱分析技术,可对阿莫西林进行非破坏性和非污染性含量测定但该法样品制备简单，分析速度快，但误差较大。荧光分光光度法在微碱性条件下阿莫西林荧光发射最强，?温度每升高10?℃,?荧光强度下降3?%，与无机离子Mg2?+?、Ca2?+?等有配合作用，丙酮的加入使荧光强度降低或猝灭,而甲醇和乙醇的加入使荧光强度增加，表面活性剂CTAB对阿莫西林有增效作用，但该法操作要求极高，但精密度差。?紫外分光光度法可直接测定含量，也可与有机试剂反应形成有色物质或是和金属形成混合物（NBS、MB、抗坏血酸、铜离子）进行测定，该法操作简便、快速、仪器价廉，干扰易消除，但灵敏度不高。以上测阿莫西林的含量的方法由复杂到简单过度，表明了人类对阿莫西林含量的测定有较多的研究。但也还有不足的地方，阿莫西林含量的测定有待我们进一步的研究。研究发现：在 pH=8.93的Tris-HCl缓冲液条件下，阿莫西林与亚甲基蓝作用后生成的产物的共振瑞利散射增强，且共振强度与一定浓度范围的阿莫西林呈线性关系，建立测定阿莫西林的简便、快速、灵敏的共振瑞利散射法，对于临床急检具有重要意义。2??实验部分2.1仪器与试剂F-2500型荧光光度计（日本日立），pH计（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）。阿莫西林标准溶液（长江师范学院分析测试中心提供）：储备液浓度1.0×10-4mol/L，工作液浓度1.0×10-5mol/L；亚甲基蓝（成都科龙化学试剂厂）：储备液浓度1.0×10-2mol/L，工作液浓度1.0×10-5mol/L；Tris-HCl缓冲溶液: 0.1mol/L HCl和0.2mol/L tris(三羟甲基氨基甲烷)混合，用pH计测定并配成pH为2.00、3.24、6.09、7.69、 8.32、 8.85、8.93、9.19??的Tris-HCl缓冲溶液。标准品为生化试剂，其余试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。2.2实验方法于10mL干燥的比色管中，分别加入1.5mL(pH=8.93)的Tris-HCl缓冲液，一定量的 1.0×10-5mol/L阿莫西林溶液，然后再加入2.0m