【毕业论文】氯酚红共振瑞利散射法测氯霉素的含量.docVIP

【标题】氯酚红共振瑞利散射法测氯霉素的含量 【作者】李 红 【关键词】共振瑞利散射法??氯霉素??氯酚红??含量测定 【指导老师】庞 向 东 【专业】化学 【正文】1?引言氯霉素（chloramphenicol，chloromycetin）（结构式见图1）由委内瑞拉链霉菌的发酵液提得的一种具有旋光活性的酰胺醇类抗生素。氯霉素类抗生素可作用于细菌核糖核蛋白体的S0S亚基，而阻挠蛋白质的合成，属抑菌性广谱抗生素。氯霉素易溶于低级醇和丙酮，微溶于水，不溶于苯和乙醚；对热稳定，在弱酸或中性溶液中稳定，在碱溶液中易失效。对革兰阴性菌作用较革兰阳性菌强，对立克次体、衣原体等也有强烈抑制作用。口服吸收良好，有效血药浓度可维持6～8h，广泛分布至全身，并能透过血脑屏障，由尿中排出。临床主要用于有特效作用的伤寒、副伤寒和立克次体病等及敏感菌所致的严重感染（如：沙门氏菌感染、肠道感染等）。所以，对氯霉素药物进行分析研究，在药品检测与临床的扩大应用方面具有深远的意义。共振瑞利散射法是近年来发展起来的一种新技术,?它已在分析化学中得到了越来越多的应用,通过研究发现,?在弱碱介质中,氯霉素与氯酚红发生反应，此时引起共振瑞利散射(RRS)?显著增强并产生新的RRS?光谱,?其最大散射波长位于410nm。在氯霉素一定浓度范围内,?散射强度(ΔI)?与氯霉素浓度成正比,?可用于该类药物的定量测定。该方法灵敏度高,也有较好的选择性，操作简便、快速等，近年来应用范围越来越广泛。因此研究氯霉素的共振瑞利散射法有重要的意义。本实验采用氯酚红为染料来进行研究，建立用共振瑞利散射法测定氯霉素的新方法。实验表明：在pH为9.25的缓冲溶液中，氯酚红与氯霉素发生化学反应，生成络合物，使RRS峰值增强，产生明显的效果，结果非常满意。?????????????????图1???氯霉素结构式2?实验部分2.1主要试剂及仪器氯霉素（长江师范学院分析测试中心提供）标准溶液：储备液浓度 1.0?× 10-4 mol/L，工作液浓度 1.0?× 10-5 mol/L。Tris-HCl系列缓冲液（pH=1.84-9.43）： 0.1 mol/L的HCl和 0.2 mol/L的Tris溶液混合，用酸度计测定，配成不同pH值的缓冲溶液。氯酚红溶液：储备液浓度 1.0?× 10-2 mol/L，工作液浓度 1.0?× 10-3? mol/L。在分析天平上称取 4.2328g?氯酚红粉末（分子式：C19H12Cl2O5S,分子量：423.28，中国上海试剂三厂）用100 mL的无水乙醇溶解，然后转移至 1000 mL的容量瓶中，用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即配成储备液。以上药品除氯霉素为生化试剂外，其余试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。日立F-2500型荧光分光光度计，pH酸度计(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。待测样品：氯霉素样液（取1支氯霉素注射液于100 mL容量瓶中，加入少许稀NaOH溶液（使其不沉淀），再用水稀至刻度；取该液1.29mL稀至1000mL；标示量：0.25g/支）。2.2?实验方法于 10 mL干燥的比色管中，依次加入一定量的 1.0?× 10-5 mol/L的氯霉素标准溶液，0.5mL的pH=9.25的Tris-HCl缓冲液，然后再加入 2.5 mL 1.0?× 10-3 mol/L的氯酚红溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。5min后在F-2500型荧光分光光度计上，采用狭缝 5 nm，以λem=λex=0?对以上溶液进行同步扫描，可得共振瑞利散射光谱，然后于最大共振瑞利散射峰（λmax）处测定体系的散射光强度IRRS和试剂空白强度I0?。△I=I?- I0?。3??结果与讨论3.1共振瑞利散射光谱在△λ=0 nm处分别对氯霉素标准溶液、氯酚红染料溶液和反应产物溶液进行同步扫描，记录RRS光谱。结果表明：氯霉素溶液在适宜酸度的Tris-HCl缓冲液中，与适量的氯酚红溶液反应后使体系的RRS显著增强，并产生了一种既不同于染料也不同于氯霉素的新的RRS光谱，其最大散射波长为410 nm，氯霉素的浓度在0-0.8×10-6 mol/L范围内与RRS强度呈良好的线性关系（图2）。???????????????????????????图2??氯霉素与氯酚红的RRS图????????????? 1.氯霉素（1.0×10-6 mol/L）；2.氯酚红（2.5×10-4 mol/L）；3-7.氯霉素（0.0、0.2、0.4、0.6、0.8mL）-氯酚红；氯霉素溶液：1.0×10-6mol/L?；氯酚红溶液：2.5×10-4 mol/L；pH=9.25，0.5mL3.2?适宜的反应条件3.2.1?溶液酸度的影响??